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分子生物学实验教程

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生物

图书介绍:本书为一种系统性的实验教材,使学生在理解分子生物学实验技术原理、熟悉实验操作基础上领会分子生物学实验技术在科学研究中的应用,初步体验通过分子生物学实验技术来解决科学问题,揭示生命现象。在设计上,整个实验课程体系分为几个大的专题,如:基因克隆,蛋白质表达纯化技术,转基因技术和分子杂交技术。整个实验教材在宏观上为一个有机的整体,具有连续性。通过实验材料传递的方法,上一次实验的结果,作为下一次实验的材料。通过该实验体系的学习学生不仅可以学习分子生物学实验技术,也可以充分理解这些技术在分子生物学研究中的应用,从而培养高素质的生物学人才。

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图书介绍

第一篇 基因克隆鉴定 1

实验1植物基因组DNA的分离与纯化 3

实验2拟南芥总RNA的提取与纯化 6

实验3逆转录cDNA的合成 9

实验4 PCR克隆目的基因 12

实验5 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳分析 18

实验6目的DNA的回收与纯化 22

实验7目的基因与克隆载体的连接 25

实验8大肠杆菌感受态细胞的制备 29

实验9大肠杆菌的转化 31

实验10阳性克隆的筛选与鉴定 33

实验11重组质粒的提取 36

实验12重组质粒酶切分析 40

第二篇 蛋白质表达与纯化 45

实验13大肠杆菌原核表达载体的设计与构建 47

实验14重组蛋白诱导表达与SDS-PAGE检测 52

实验15重组蛋白的分离与纯化 57

第三篇 转基因技术 61

实验16烟草叶盘法遗传转化 63

实验17拟南芥浸花法遗传转化 69

实验18转基因斑马鱼的构建 73

第四篇 分子杂交技术 75

实验19 Southern杂交分析 77

实验20 Northern杂交分析 81

实验21 Western Blot印迹技术 84

第五篇 蛋白质—DNA相互作用分析 87

实验22凝胶迁移实验(EMSA) 89

实验23酵母单杂交技术 93

实验24杂色质免疫共沉淀(ChIP) 97

第六篇 蛋白质—蛋白质相互作用分析 103

实验25酵母双杂交技术 105

实验26免疫共沉淀分析 112

实验27 GST pull-down技术 115

实验28双分子荧光互补技术 118

附录 实验报告 123

实验1植物基因组DNA的分离与纯化实验报告 123

实验2拟南芥总RNA的提取与纯化实验报告 125

实验3逆转录cDNA的合成实验报告 127

实验4 PCR克隆目的基因实验报告 129

实验5 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳分析实验报告 131

实验6目的DNA的回收与纯化实验报告 133

实验7目的基因与克隆载体的连接实验报告 135

实验8大肠杆菌感受态细胞的制备实验报告 137

实验9大肠杆菌的转化实验报告 139

实验10阳性克隆的筛选与鉴定实验报告 141

实验11重组质粒的提取实验报告 143

实验12重组质粒酶切分析实验报告 145

实验13大肠杆菌原核表达载体设计与构建实验报告 147

实验14重组蛋白诱导表达与SDS-PAGE检测实验报告 149

实验15重组蛋白的分离与纯化实验报告 151

实验16烟草叶盘法遗传转化实验报告 153

实验17拟南芥浸花法遗传转化实验报告 155

实验18转基因斑马鱼的构建实验报告 157

实验19 Southern杂交分析实验报告 159

实验20 Northern杂交分析实验报告 161

实验21 Western Blot印迹技术实验报告 163

实验22凝胶迁移实验(EMSA)实验报告 165

实验23酵母单杂交技术实验报告 167

实验24染色质免疫共沉淀(ChIP)实验报告 169

实验25酵母双杂交技术实验报告 171

实验26免疫共沉淀分析实验报告 173

实验27 GST pull-down技术实验报告 175

实验28双分子荧光互补技术实验报告 177

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