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第一章　生物化学实验基本常识和常见仪器的使用 1

第一节　生物化学实验基本常识 1

一、实验室规则 1

二、实验记录及实验报告 2

三、实验误差与数据处理 3

四、玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制 5

第二节　常用仪器的使用方法 6

一、容量玻璃器皿 6

二、移液器 7

三、电子分析天平 8

四、电动离心机 8

五、干燥箱和恒温箱 9

六、电热恒温水浴锅 10

七、722-S型分光光度计 10

八、pHS-3C型数字酸度计 11

第二章　分光光度技术 12

第一节　基本原理 12

一、光的基本知识 12

二、吸光度与透光率 13

三、朗伯-比尔（Lambert-Beer）定律 14

第二节　分光光度计结构简介 15

第三节　分光光度技术的应用 16

一、定量分析 16

二、用紫外光谱鉴定化合物 17

第四节　分光光度法的误差 17

第三章　电泳技术 18

第一节　电泳的基本原理及影响因素 18

一、基本原理 18

二、影响迁移率的主要因素 19

三、电泳的分类 21

第二节　几种常见的电泳法 21

一、醋酸纤维素薄膜电泳 21

二、琼脂糖凝胶电泳 22

三、聚丙烯酰胺凝胶电泳 22

四、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 24

五、等电聚焦电泳 24

六、免疫电泳 24

七、双向凝胶电泳 25

八、毛细管电泳 25

第三节　电泳后的染色 26

一、蛋白质染色 26

二、核酸染色 27

第四节　电泳结果处理 27

一、凝胶干燥技术 27

二、凝胶扫描技术 28

三、凝胶成像技术 28

四、凝胶印迹技术 28

第四章　层析技术 29

第一节　吸附层析 30

一、原理 30

二、吸附剂的选择 30

三、吸附能力 30

第二节　分配层析 31

一、原理 31

二、操作要点 31

第三节　离子交换层析 32

一、原理 32

二、离子交换剂的类型 32

三、离子交换层析基本操作 33

第四节　凝胶层析 34

一、原理 34

二、凝胶的种类 35

三、操作方法 36

四、应用 38

第五节　亲和层析 38

一、原理 38

二、操作方法 39

第六节　高效液相色谱法 40

一、原理 40

二、高效液相色谱仪 40

三、色谱方法的选择 42

四、操作及注意事项 42

第五章　离心技术 43

第一节　基本原理 43

一、相对离心力 43

二、沉降系数 44

三、沉降速度 45

四、沉降时间 45

第二节　离心机的性能及用途 45

一、低速离心机 46

二、高速离心机 46

三、超速离心机 46

第三节　离心方法 47

一、差速离心 47

二、速度区带离心 47

三、等密度梯度离心 48

四、离心操作要领 48

第六章　生物大分子制备技术 49

第一节　材料的选择和预处理 50

一、动物材料 50

二、微生物材料 51

三、植物材料 51

第二节　细胞的破碎及细胞器的分离 52

一、细胞的破碎 52

二、细胞器的分离 53

第三节　生物大分子的提取和分离纯化 53

一、蛋白质和酶的提取及分离纯化 53

二、核酸的提取和分离纯化 55

第四节　样品的浓缩、干燥、保存及纯度鉴定 56

一、样品的浓缩 56

二、干燥 57

三、保存 57

四、纯度鉴定 58

第七章　膜分离技术 59

第一节　基本原理 59

一、原理 59

二、膜的性质 59

第二节　常见的几种膜分离技术 60

一、透析 60

二、超滤 60

三、电渗析 61

四、纳米过滤 61

第八章　酶联免疫技术（ELISA） 62

第一节　基本原理 62

一、检测抗体的间接法 62

二、检测抗原的双抗体夹心法 63

三、检测抗原的竞争法 63

第二节　操作要点 64

一、标本的采集与保存 64

二、试剂的准备 64

三、加样 65

四、保温 65

五、洗涤 65

六、显色和比色 66

七、结果判断 67

第九章　生物化学实验 68

氨基酸及蛋白质类实验 68

实验一 薄层层析法分离氨基酸 68

实验二 纸层析法分离氨基酸 70

实验三 氨基氮的测定——甲醛滴定法 72

实验四 蛋白质的沉淀反应 74

实验五 蛋白质的两性反应和等电点测定 76

实验六 蛋白质含量的测定 78

实验七 乙酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白质 87

实验八 蛋白质的脱盐技术 90

实验九　酪蛋白的制备 93

实验十 聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法分离蛋白质 94

实验十一 SDS-聚丙烯酰胺凝胶（CPAGE）电泳测定蛋白质相对分子质量 98

实验十二 血清免疫球蛋白的分离纯化及鉴定 101

核酸类实验 106

实验十三 动物组织DNA的提取与含量测定 106

实验十四 酵母RNA的提取及定性定量鉴定 108

实验十五 质粒DNA的提取 111

实验十六　PCR基因扩增实验 114

实验十七 DNA琼脂糖凝胶电泳 116

酶学实验 118

实验十八 温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响 118

实验十九　琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制 120

实验二十 血清乳酸脱氢酶同工酶的分离与测定 122

实验二十一 血清转氨酶活性测定（Mohun法） 124

实验二十二 蛋白酶活力测定 127

实验二十三 大麦萌发前后淀粉酶活力的比较 129

实验二十四 酶联免疫吸附法（ELISA）测定克伦特罗 131

实验二十五 酶联免疫吸附法（ELISA）测定食品中磺胺二甲嘧啶残留 135

实验二十六 蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法 137

维生素类实验 139

实验二十七 维生素B2的定量测定（荧光法） 139

实验二十八 维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法） 141

实验二十九 脂溶性维生素的测定（高效液相色谱法） 143

糖类实验 147

实验三十 肝糖原的提取与鉴定 147

实验三十一 总糖和还原糖测定（3,5-二硝基水杨酸比色法） 149

实验三十二 费林试剂热滴定法测定还原糖 151

实验三十三 血糖的定量测定（福林-吴宪法） 154

实验三十四 果胶的提取 156

脂类实验 158

实验三十五 粗脂肪的定量测定（索氏抽提法） 158

实验三十六 卵磷脂的提取及鉴定 160

实验三十七 脂肪碘值的测定 162

实验三十八 脂肪酸价的测定 164

其它实验 165

实验三十九 水分的测定 165

实验四十 血清无机磷的定量测定 168

实验四十一 畜禽肉中己烯雌酚残留的测定（高效液相色谱法） 170

实验四十二 叶绿素含量的测定（分光光度法） 172

附录 174

一、常用溶液浓度的单位及计算 174

二、标准溶液的配制与标定 175

三、常用缓冲溶液的配制 176

四、一般化学试剂的分级 182

五、易变质和需要特殊方法保存的试剂 182

六、常用市售酸、碱的浓度 183

七、硫酸铵饱和度常用表 183

八、指示剂 185

九、元素的相对原子质量表 187

十、常见蛋白质主要参数 188

十一、常用凝胶数据表 190

十二、实验室分析用水规格及标准 192

十三、离心机转速与相对离心力的换算图 193

主要参考书 194

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