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第一部分 高效液相色谱法的理论基础 1

1 简要的历史评述及基本定义和方程式 1

1-1 引言 1

1-2 基本定义和方程式 3

1-3 谱带的展宽--塔板高度和塔板数 9

1-4 分辨率 11

1-5 液相色谱的时间最佳化 14

2-1 分辨和速度的基本原理 19

2 高效液相色谱法的理论(Ⅰ)色谱柱的设计 19

2-2 影响分辨率的动力学和热力学因素 21

2-3 分离速度 25

2-4 峰展宽的动力学和塔板高度 26

2-5 实用操作条件及颗粒大小和柱长度的选择 35

2-6 柱的直径 40

2-7 制备规模的高效液相色谱 43

注1 高斯误差曲线 44

注2 保留值参数 45

注3 分配等温线及к＇值 47

3 高效液相色谱法的理论(Ⅱ)液相色谱中溶质与流动相及固定相的相互作用 49

3-1 引言 49

3-2 实验的方法 55

3-3 结论 71

4 高效液相色谱的理想化仪器设计 73

4-1 理想的液相色谱仪 73

4-2 液相色谱的仪器 74

4-3 辅助设备 94

4-4 结论 95

第二部分 高效液相色谱法的技术 97

5 液-固(吸附)色谱法 97

5-1 引言 97

5-2 填充物类型 98

5-3 吸附剂结构及与溶质的相互作用 100

5-4 高性能液-固色谱柱及柱填充物 104

5-5 液-固色谱的理论模型 106

5-6 溶剂在液-固色谱中的作用 107

5-7 吸附剂的标准化 113

5-8 实用上的问题 116

6 液-液(分配)色谱法 121

6-1 引言 121

6-2 液-液色谱的相体系 125

6-3 液-液色谱使用的载体 127

6-4 涂层载体的制备 128

6-5 前置柱的制备 130

6-6 实用方面的问题 130

6-7 离子对分配色谱法 131

6-8 高载敷量的色谱柱 133

7 键合相色谱法 135

7-1 引言 135

7-2 键合相的制备 135

7-3 键合相的效率比较 138

7-4 键合相色谱的柱和填充物 138

7-5 键合相的色谱特性 144

7-6 键合相的保留度和选择性 146

8 离子交换色谱法 149

8-1 引言 149

8-2 离子交换剂 150

8-3 离子交换色谱中的交换反应 159

8-4 离子交换色谱的流动相 163

8-5 离子交换色谱分离的典型例子：不饱和羧酸 165

9 凝胶渗透色谱法 172

9-1 引言 172

9-2 分析方面的应用 173

9-3 有关文献和文摘的问题 174

9-4 凝胶色谱的发展 174

9-5 分离过程的理论及机理 175

9-6 分配系数 177

9-7 柱和柱填充物 178

9-8 高速凝胶色谱 183

10 凝胶渗透色谱法对高聚物的鉴别 188

10-1 引言 188

10-2 凝胶渗透色谱的基本仪器设备 193

10-3 根据凝胶色谱图计算分子量的分布 196

10-4 凝胶渗透色谱的实验 211

11-1 引言 217

11 生物亲和色谱法 217

11-2 载体基体 219

11-3 间隔基 222

11-4 洗脱 222

11-5 例子：脱氢酶的分离 223

12 液相色谱法的实用入门 235

12-1 仪器 235

12-2 关于液相色谱仪操作的一些问题 237

12-3 固定相的选择 241

12-4 流动相的选择 244

13 高效液相色谱中具有典型结果的实用性实验 253

实验1 液相色谱仪器死体积的影响 253

实验2 柱填充物的粒度和类型对谱带加宽作用和谱带分辨率的影响 256

实验3 粒度对柱性能的影响及比较球形颗粒与无定形颗粒对柱性能的影响 260

实验4 粒度对分辨率和柱效影响的研究 261

实验5 样品导入技术 265

实验6 紫外检测器-断流扫描技术 268

实验7 在特定波长监控时对组分的灵敏检测 270

实验8 检测器灵敏度 274

实验9 选择性和通用型检测器的串联使用 277

实验10 柱温和流动相组成对溶质保留值的影响 278

实验11 离子交换分离对温度的依赖性 280

实验12 柱填充物的选择 282

实验13 吸附相和键合相填充物之间选择性的差别 285

实验14 梯度洗脱分离的最佳化 287

实验15 使用梯度洗脱法分离的最佳化 290

实验16 梯度洗脱在液相色谱法中的作用 293

实验17 用于定量分析的困难分离的迅速展开 295

实验18 定量测定-峰面积对峰高测量的精度比较 299

实验19 制备色谱法 301

实验20 利用分子大小来分离小分子 303

实验21 马肝脱氢酶在5＇-AMP-Sepharose 4.B.上的纯化 307

附录Ⅰ 高效液相色谱的检测器 310

AI-1 检测器参数 310

AI-1-1 噪声 310

AI-1-2 响应值 311

AI-1-5 其它参数 312

AI-1-3 响应的线性 312

AI-1-4 检测限(DL) 312

AI-2 紫外吸收(UV)检测器 313

AI-2-1 工作原理 315

AI-2-2 检测器特性 318

AI-3 折光率(RI)检测器 319

AI-3-1 工作原理 321

AI-3-2 检测器特性 322

AI-4 移动丝检测器 323

AI-4-1 工作原理 324

AI-4-2 检测器特性 325

AI-5 其它检测器 330

AI-5-1 极谱检测器 330

AI-5-2 电导率检测器 332

AI-5-3 荧光计 332

AI-5-4 其它装置 333

AI-6 结论 333

AII-1 柱的准备 335

附录Ⅱ 柱填充技术 335

AII-2 柱填充物的准备 336

AII-3 干填充技术(粒度〉20微米) 337

AII-3-1 敲击充填法 337

AII-4 湿法充填步骤 337

AII-4-1 所需设备 337

AII-4-2 淤浆充填技术 338

AII-4-3 柱头 340

AII-4-5 分配色谱法的柱子制备 341

AII-4-4 柱的活化和再调节 341

附录Ⅲ 液相色谱设备制造厂商 343

AIII-1 泵类 343

AIII-2 注样阀 343

AIII-3 检测器 343

AIII-4 注射器供应商 344

AIII-5 柱填充材料 344

AIII-6 整机液相色谱仪 345

附表 液相色谱仪 346

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