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第一章 土贝母研究进展 1

第一节 土贝母的化学成分 1

一、皂苷类化合物 4

二、甾醇类化合物 8

三、生物碱类化合物 11

四、其他类化合物 12

第二节 土贝母的药理作用 13

一、抗肿瘤作用 13

二、抗病毒活性 18

三、对免疫功能的影响 18

四、抗炎活性 19

五、溶血作用 19

六、杀精子作用 19

七、助溶作用 19

第三节 土贝母的毒性作用 20

一、细胞毒性 20

二、急性毒性 20

三、亚急性毒性 21

第四节 土贝母的药代动力学及临床研究概况 22

第二章 土贝母化学成分的研究 24

第一节 材料与方法 25

一、试验材料 25

二、仪器设备 26

三、药品、试剂 26

四、土贝母化学成分的提取与分离 27

第二节 结果与分析 32

一、化合物的结构解析 40

二、化合物的结构鉴定数据 64

第三节 讨论 72

第三章 土贝母的营养成分及挥发油成分分析 74

第一节 材料与方法 74

一、试验材料 74

二、测定方法 74

第二节 结果与分析 76

一、主要营养成分 76

二、可溶性糖含量 76

三、矿质元素含量 77

四、氨基酸组成及含量 77

五、挥发油成分 78

第三节 讨论 85

第四章 大孔吸附树脂分离富集土贝母总皂苷的研究 86

第一节 材料与方法 87

一、试验材料 87

二、仪器与试剂 87

三、标准曲线考察 87

四、样品溶液的制备 88

五、样品含量测定方法 88

六、静态吸附量考察 89

七、大孔吸附树脂洗脱度考察 89

八、最大动态吸附量考察 89

第二节 结果与分析 90

一、最佳波长的选择 90

二、标准曲线的制备 90

三、静态吸附量分析 91

四、大孔吸附树脂洗脱度考察 93

五、树脂洗脱量的考察 94

六、最大动态吸附量考察 94

七、乙醇浓度对洗脱效果的影响 95

八、大孔树脂吸附条件的优化 97

九、工艺验证试验 100

第三节 结论 100

第四节 讨论 101

第五章 HPLC法测定土贝母苷甲方法的建立 103

第一节 材料与方法 103

一、试验材料 103

二、仪器设备 104

三、试剂和药品 104

四、标准品溶液的制备 104

五、样品液的制备 104

六、色谱条件 105

第二节 结果与分析 105

一、最佳波长的选择 105

二、流动相的选择 105

三、标准样品的浓度—峰面积线性响应范围 106

四、精密度试验 108

五、稳定性试验 108

六、重复性试验 108

七、回收率试验 108

八、土贝母样品的测定 109

第三节 讨论 111

第六章 土贝母的抗肿瘤活性 112

第一节 试验材料 113

一、细胞与药物 113

二、试剂 114

三、仪器设备 115

第二节 测定方法 115

一、细胞培养 115

二、增殖指标的测定 116

三、细胞形态学观察 116

四、细胞核用Hoechst33258染色 116

五、细胞周期观察 117

六、细胞凋亡观察 117

七、免疫组化法测定hTERT和C-myc的表达 117

八、端粒酶活性检测 118

第三节 结果与分析 119

一、土贝母提取物对HL60的生长的抑制效应 119

二、土贝母提取物对WM451生长的抑制效应 120

三、土贝母提取物对KB生长的抑制效应 120

四、土贝母提取物对MDA231生长的抑制效应 122

五、土贝母提取物对Hela生长的抑制效应 123

六、单体化合物对肿瘤细胞生长的影响 124

七、土贝母总苷、苷甲对SH-SY5Y细胞的生长抑制作用 125

八、形态学观察 126

九、流式细胞术检测细胞凋亡与细胞周期 129

十、SH-SY5Y细胞C-myc和hTERT抗原免疫细胞化学染色 132

十一、土贝母皂苷对SH-SY5Y细胞端粒酶活性的影响 135

第四节 讨论 135

附录：缩略词表 139

参考文献 141

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