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第一部分 基础生化实验 Part One Basic Biochemical Experiment 1

实验一 蛋白质的定量测定(一)——微量Kjeldahl定氮法 1

1 Quantitation of Protein(1)——Kjeldahls Method 5

实验二 蛋白质的定量测定(二)——双缩脲法 10

2 Quantitation of Protein(2)——Biuret Method 12

实验三 蛋白质的定量测定(三)——Folin-酚试剂法(Lowry法) 14

3 Quantitation of Protein(3)——Folin-phenol Reagent Method(Lowry Method) 16

实验四 蛋白质的定量测定(四)——紫外吸收法 19

4 Quantitation of Protein(4)——Ultraviolet Absorption Method 21

实验五 蛋白质的定量测定(五)——染料结合比色法 23

5 Quantitation of Protein(5)——Dye-binding Method 25

实验六 蛋白质的性质 27

6 Properties of Protein 34

实验七 酶的性质 42

7 Properties of Enzyme 46

实验八 底物浓度对酶活性的影响——蔗糖酶米氏常数的测定 51

8 Substrate Concentration Affecting Enzyme Activity——Michaelis Constant Assay of Sucrose Enzyme 55

实验九 动物组织中核酸的提取与鉴定 60

9 Extraction and Identification of Nucleic Acid from Animal Tissue 63

实验十 质粒DNA的提取 67

10 Isolation of Plasmid DNA 69

实验十一 多肽的末端分析 72

11 Analysis of Terminal of Polypeptide 75

实验十二 蛋白质及肽的N-末端氨基酸DNS分析法——聚酰胺薄膜层析技术 79

12 Analysis of the N-terminal Amino Acids of Protein or Peptide by the Method of DNS——the Technique of Polyamide Membrane Chromatography 83

实验十三 核酸的定量测定(一)——紫外分光光度法 87

13 Quantitation of Nucleic Acid(1)——Ultraviolet Absorption Method 89

实验十四 核酸的定量测定(二)——定磷法(钼蓝反应) 91

14 Quantitation of Nucleic Acid(2)——Quantitation of Phosphorus Method 94

实验十五 核酸的定量测定(三)——定糖法 97

15 Quantitation of Nucleic Acid(3)——Quantitation of Saccharide Method 101

实验十六 α-糜蛋白酶注射剂效价测定 105

16 Titer Assay of α-Chymotrypsin Injection 108

实验十七 胰酶中蛋白酶活力的测定 111

17 Activity Assay of Protease of Pancreatin 114

实验十八 胰脂肪酶的活力测定 118

18 Activity Assay of Steapsin 121

实验十九 酶的抑制动力学 124

19 Inhibition Dynamics of Enzyme 128

实验二十 维生素C的定量测定 133

20 Quantitation of Vitamin C 136

实验二十一 运动对尿乳酸排出量的影响 140

21 Influence of Sport on Lactic Acid in Urine 142

实验二十二 肌糖原的酵解作用 144

22 The Glycolysis of Muscle Glycogen 147

实验二十三 脂肪酸β-氧化 150

23 β-Oxidation of Fatty Acid 153

第二部分 用于药物研究的生化技术实验 Part Two Biochemical Technique Experiment Used for Research on the Medical Speciality 157

实验二十四 凝胶层析法——用Sephadex G-50分离核黄素与丙种球蛋白 157

24 Gel Chromatography——Separating Riboflavin and BSA by Sephadex G-50 161

实验二十五 聚丙烯酰胺凝胶电泳技术——柱式不连续电泳分析白蛋白 166

25 Gel Electrophoresis——Analyzing Albumin by Pillared Discontinuous Electrophoresis 170

实验二十六 琼脂糖凝胶电泳技术分析DNA 175

26 Analyze DNA by Agarose Gel Electrophoresis 177

实验二十七 PCR扩增DNA 179

27 PCR Amplify DNA Fragment 181

实验二十八 固定化细胞法生产L—天冬氨酸 184

28 Preparation of L-Aspartic Acid by Immobilized Cell Method 188

实验二十九 银耳多糖的制备及一般鉴定 192

29 Preparation and Generic Identify of Tremella Polysaccharide 195

实验三十 鱼油中不饱和脂肪酸EPA和DHA的制备 198

30 Preparation of EPA and DHA from Fish Oil 200

实验三十一 离子交换树脂层析分离混合氨基酸 203

31 Separating Mixed Amino Acids by Ion-exchange Chromatography 205

实验三十二 离子交换法制取肝素 208

32 Producing Heparin by Ion-exchange Method 212

实验三十三 溶菌酶的结晶和活力测定 217

33 Crystallization and Activity Assay of Lysozyme 221

实验三十四 盐析法制备免疫球蛋白 226

34 Preparation of Immunoglobulin by Salting Out Method 229

实验三十五 琼脂糖凝胶电泳——LDH同工酶 233

35 Separating LDH Isozyme by Agarose Gel Electrophoresis 236

实验三十六 免疫电泳技术——胎儿甲种球蛋白对流免疫电泳 239

36 Immune Electrophoresis——Assay of Fetuin by Counter Immunoelectrophoresis 241

实验三十七 蛋白质的分子量测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法 244

37 Assay Molecular Weight of Protein——SDS-polyacrylamide Gel Electrophoresis 247

实验三十八 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦 250

38 Polyacrylamide Gel Isoelectrofocusing 253

实验三十九 药用植物的同工酶分析 257

39 Isoenzyme Assay of Medical Plants 259

实验四十 微量酶联免疫法测定胰岛素 262

40 Assay of Insulin by Enzyme-linked Immunosorbent Assay(ELISA) 266

实验四十一 植物血球凝集素的提取、分离及活性检测 270

41 Extraction,Separation and Activity Assay of Phytohemagglutinin 273

实验四十二 多糖的分析实验——蒽酮比色定糖法及糖的纸上色谱鉴定法 276

42 Analyze of Polysaccharide——Quantitation of Saccharide by Anthrone Colorimetry and Identification of Saccharide by Paper Chromatography 279

实验四十三 猪胰糜蛋白酶的制备和纯度鉴定 283

43 Preparation and Purity Indentification of Hog Chymotrypsin 286

实验四十四 偶联法制备固定化胰蛋白酶 289

44 Preparation of Immobilized by Couple Method 294

实验四十五 亲和层析法制取胰蛋白酶抑制剂 300

45 Preparation of Trypsin Inhibitor By Affinity Chromatography 304

实验四十六 固定化细胞法制备L-苹果酸 308

46 Producing L-Malic Acid by Immobilized Cell Method 312

第三部分 药物作用的生化分析实验 316

Part Three Biochemical Analytical Experiment of Drug Action 316

实验四十七 观察四氯化碳中毒性肝炎血清中谷丙转氨酶的活力变化 316

47 Observing Activity Changes of Serum Glutamate Pyruvatetransaminase in Phenixin-induced Toxic Hepatitis 320

实验四十八 血清总胆固醇及甘油三酯的测定 325

48 Determinations of Total Serum Cholesterol and Triglyceride 328

实验四十九 激素的活力测定——胰岛素与肾上腺素对血糖浓度的影响(一) 332

49 Activity Assay of Insulin——Influence of Insulin and Adrenaline on Blood Sugar Concentration(1) 336

实验五十 激素的活力测定——胰岛素与肾上腺素对血糖浓度的影响(二) 341

50 Activity Assay of Insulin——Influence of Insulin and Adrenaline on Blood Sugar Concentration(2) 344

实验五十一 药物毒性的生化分析——血清尿素氮的测定 347

51 Biochemical Analysis of Drug Toxicity——Assay of Serum Urea Nitrogen 349

实验五十二 有机磷化合物对胆碱酯酶的抑制作用 351

52 Organic Phosphorous Compounds Inhibiting Choline Esterase 355

实验五十三 磺胺类药物在体内的代谢分析 359

53 Metabolic Analyze of Sulfonamides in Vivo 362

实验五十四 刀豆球蛋白对小鼠脾淋巴细胞DNA合成的影响 365

54 Influence of Canavalin on DNA Replication in Mouse Spleen Lymphocyte 367

附录 370

附录一 实验须知 370

附录二 试剂及试剂配制和保存 380

附录三 层析法常用数据表 395

附录四 某些蛋白质的物理性质 402

附录五 氨基酸的物理常数 403

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