脂肪细胞分化及其调控机制PDF格式文档图书下载

绪论 1

第一部分 文献研究 7

第一章 脂肪细胞分化概论 7

一、脂肪细胞分化的干细胞学说 7

二、脂肪细胞分化过程及表型特征 7

三、脂肪细胞分化各阶段的标志分子 8

（一）脂肪细胞分化早期阶段的标志分子 8

（二）脂肪细胞分化中晚期阶段的标志分子 9

四、脂肪细胞分化的转录调控 9

（一）PPARs 10

（二）C/EBPs 11

（三）SREBPs 12

（四）调控脂肪细胞分化的其他转录因子 13

第二章 脂肪代谢与脂肪细胞分化 15

一、脂肪代谢概述 15

二、脂肪的合成代谢与脂肪细胞分化 15

（一）甘油三酯的合成与脂肪细胞分化 16

（二）α-磷酸甘油的来源 16

（三）脂酰CoA的来源 16

三、脂肪的分解代谢与脂肪细胞分化 17

（一）脂肪动员与脂肪细胞分化 17

（二）甘油代谢 17

（三）脂肪酸β氧化 18

（四）脂肪酶与脂肪分解 18

四、脂滴包被蛋白Perilipin A与脂肪细胞分化 21

（一）脂滴包被蛋白概述 22

（二）Perilipins的结构 22

（三）Perilipin A的功能 23

（四）脂肪细胞内调控Perilipin A功能的蛋白因子 25

（五）Perilipin A表达水平与机体肥胖、胰岛素抵抗之间的相关性 26

第三章 脂肪细胞分化相关的信号转导通路 27

一、cAMP/PKA信号通路与脂肪细胞分化 27

（一）活化型G蛋白（Stimulating G Protein， Gs）依赖的机制 27

（二）磷酸二酯酶（ Phosphodiesterase， PDE）依赖的机制与脂肪细胞分化 27

二、MAPK信号通路与脂肪细胞分化 29

（一）ERKs信号通路对脂肪细胞分化的调控 29

（二）p38 MAPK信号通路对脂肪细胞分化的调控 32

（三）JNKs信号通路对脂肪细胞分化的调控 33

三、Wnt/β-catenin信号通路与脂肪细胞分化 33

（一）Wnt/β-catenin信号通路概述 33

（二）Wnt/β-catenin信号通路调控脂肪细胞分化的作用 34

（三）Wnt/β-catenin信号通路调控脂肪细胞分化的分子机制 35

四、胰岛素受体信号通路与脂肪细胞分化 36

（一）胰岛素受体信号通路概述 36

（二）炎性信号与胰岛素信号转导缺陷 37

（三）胰岛素受体信号通路调控脂肪细胞分化 39

五、Jak/STAT3信号通路与脂肪细胞分化 40

（一）Jak/STAT3信号通路概述 40

（二）Jak/STAT3信号通路调控脂肪细胞分化 41

第四章 调节脂肪细胞分化的因素 44

一、激素调节 44

（一）儿茶酚胺类激素 44

（二）胰岛素 45

二、细胞因子调节 45

（一）肿瘤坏死因子 45

（二）瘦素 46

（三）白细胞介素-6 46

（四）脂联素 47

三、血糖调节 48

四、外源因素调节 50

（一）禁食与重新饲喂 50

（二）饮食钙 50

（三）咖啡因 51

（四）乙醇 51

（五）维生素A酸 52

（六）饱和脂肪酸与多不饱和脂肪酸 52

（七）大豆异黄酮 52

（八）中药活性成分 53

参考文献 54

第二部分 试验研究 85

第五章 L-Gln对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响 85

引言 85

一、材料与方法 85

（一）试验动物 85

（二）试剂 85

（三）仪器及器械 85

（四）主要溶液配方 86

（五）试验分组 86

（六）前体脂肪细胞的分离培养及形态学观察 86

（七）MTT比色 87

（八）油红O染色提取 87

（九）油红O染色 87

（十）统计方法 87

二、结果与分析 87

（一）形态观察 87

（二）不同处理组对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响 88

（三）不同处理组对大鼠前体脂肪细胞分化的影响 89

（四）4类培养液中最佳增殖、分化处理组间效果比较 89

三、讨论 90

参考文献 91

第六章 大黄素和大黄酸调控大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的比较研究 93

引言 93

一、材料与方法 93

（一）主要仪器设备及耗材 93

（二）试验动物及主要试剂 94

（三）前体脂肪细胞培养 94

（四）药品处理 94

（五）MTT比色测定细胞增殖 94

（六）流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡 94

（七）油红O染色提取检测细胞分化 95

（八）统计学处理 95

二、结果 95

（一）EMO和RH对前体脂肪细胞增殖的影响 95

（二）EMO和RH对前体脂肪细胞的细胞周期和凋亡的影响 96

（三）EMO和RH对前体脂肪细胞分化的影响 97

（四）EMO对前体脂肪细胞聚脂形态的影响 98

三、讨论 99

参考文献 103

第七章 慢性高剂量胰岛素刺激脂肪分解抑制猪脂肪细胞分化 107

引言 107

一、材料与方法 108

（一）试验动物 108

（二）主要试剂 108

（三）猪脂肪细胞原代培养 108

（四）甘油测定 109

（五）RT-PCR检测Perilipin A和PPARγ2的mRNA表达 109

（六）Western blot检测perilipin A和PPARγ的蛋白表达 109

（七）统计学分析 110

二、结果 110

（一）慢性高剂量胰岛素对猪脂肪细胞脂肪分解的影响 110

（二）慢性高剂量胰岛素对猪脂肪细胞脂质积聚形态的影响 110

（三）慢性高剂量胰岛素对异丙肾上腺素刺激的脂肪细胞脂解应答的影响 110

（四）慢性高剂量胰岛素对Perilipin A和PPARγ基因mRNA和蛋白表达的影响 111

（五）慢性高剂量胰岛素对HSL、ATGL、TNF-α和IL-6基因mRNA表达的影响 112

（六）PKA抑制剂对胰岛素刺激的脂肪分解及Perilipin A基因表达的影响 113

（七）ERK抑制剂对胰岛素刺激的脂肪分解及Perilipin A基因表达的影响 114

三、讨论 115

参考文献 118

第八章 白细胞介素-6调控猪脂肪细胞分化的作用及其分子机制 123

引言 123

一、材料与方法 124

（一）试验动物 124

（二）主要试剂 124

（三）猪脂肪细胞原代培养 125

（四）甘油含量测定 125

（五）RT-PCR检测脂肪细胞分化相关基因的mRNA表达 125

（六）Western blot检测脂肪细胞分化相关基因的蛋白表达 126

（七）统计学分析 127

二、结果与分析 127

（一）IL-6对猪脂肪细胞脂肪分解的影响 127

（二）IL-6对猪脂肪细胞脂质积聚形态的影响 127

（三）猪脂肪细胞中IL-6R和gp130基因的鉴定 127

（四）IL-6对猪脂肪细胞Perilipin A、PPARγ2、HSL和ATGL基因mRNA表达的影响 128

（五）IL-6对猪脂肪细胞中Perilipin A、PPAR γ、HSL和ATGL蛋白表达的影响 129

（六）IL-6对脂肪酸氧化相关基因表达的影响 129

（七）PKA信号通路对IL-6刺激的脂肪细胞脂肪分解的影响 129

（八）ERK信号通路对IL-6刺激的脂肪细胞脂肪分解的影响 130

三、讨论 132

参考文献 137

第九章 罗格列酮抑制白细胞介素-6对猪脂肪细胞分化的影响 143

引言 143

一、材料与方法 144

（一）试验动物 144

（二）主要试剂 144

（三）猪脂肪细胞原代培养 144

（四）甘油含量测定 144

（五）油红0染色提取 144

（六）Western blot analysis 145

（七）RT-PCR检测 Perilipin A、PPARγ2、FAS、IL-6和PGC-1 α的mRNA表达 145

（八）数据分析 146

二、结果 146

（一）罗格列酮对慢性高剂量IL-6刺激的猪脂肪细胞脂肪分解的影响 146

（二）罗格列酮对慢性高剂量IL-6刺激的猪脂肪细胞聚脂形态的影响 146

（三）罗格列酮对慢性高剂量IL-6刺激的猪脂肪细胞聚脂含量的影响 147

（四）罗格列酮抑制IL-6刺激的ERK1/2磷酸化 148

（五）罗格列酮对IL-6刺激的脂肪代谢相关基因mRNA表达的影响 148

（六）罗格列酮对慢性高剂量IL-6刺激的猪脂肪细胞Pperilipin A、 PPARγ蛋白表达的影响 150

三、讨论 150

参考文献 152

第十章 慢病毒载体介导shRNA干扰IL-6Rα基因表达削弱IL-6对猪脂肪细胞分化的影响 157

引言 157

一、材料与方法 158

（一）主要试剂 158

（二）shRNA oligo序列的设计与合成 158

（三）shRNA重组慢病毒表达质粒的构建及鉴定 159

（四）重组慢病毒的包装及滴度测定 159

（五）猪前体脂肪细胞的原代培养 160

（六）慢病毒感染猪前体脂肪细胞 160

（七）甘油含量测定 160

（八）油红O染色提取法检测脂肪细胞脂质积聚 160

（九）RT-PCR检测 160

（十）Western blotting检测 161

（十一）统计学分析 161

二、结果 162

（一）IL-6Rα-shRNAs重组表达质粒鉴定 162

（二）重组慢病毒包装及滴度测定 162

（三）IL-6Rα-shRNAs重组慢病毒对猪脂肪细胞IL-6Rα基因表达的影响 162

（四）IL-6Rα-RNAi对IL-6刺激的猪脂肪细胞脂肪分解的影响 163

（五）IL-6Rα-RNAi对IL-6刺激的脂肪细胞聚脂含量的影响 163

（六）IL-6Rα-RNAi对IL-6刺激的生脂相关基因表达的影响 164

（七）IL-6Rα-RNAi对IL-6刺激的ERK1/2磷酸化的影响 165

三、讨论 165

参考文献 168

缩略词表 173

查看更多关于脂肪细胞分化及其调控机制的内容