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第一篇 细菌实验篇 2

第一章 结核分枝杆菌与结核病 2

第一节 结核分枝杆菌主要生物学性状 2

第二节 结核分枝杆菌的致病性 3

第三节 结核分枝杆菌感染的免疫性 4

第四节 结核分枝杆菌感染的实验室检查 5

第五节 分枝杆菌菌种初步鉴定 11

第六节 结核分枝杆菌药物敏感性试验 12

附录 15

参考文献 17

第二章 分枝杆菌快速培养基的研制及其应用 18

第一节 快速培养基的研制 18

第二节 快速培养基的使用 19

第三节 新型培养基的应用 21

参考文献 24

第三章 结核分枝杆菌L型检查研究 26

第一节 结核分枝杆菌L型的形成 26

第二节 结核分枝杆菌L型的形态 32

第三节 结核分枝杆菌L型的生物学特性 34

第四节 结核分枝杆菌L型的药物敏感性 35

第五节 结核分枝杆菌L型的致病性 44

第六节 结核分枝杆菌L型的免疫性 45

第七节 结核分枝杆菌L型感染的诊断 46

第八节L型实验室检查的临床意义与质量控制 50

附录L型培养基 54

参考文献 59

第四章 噬菌体法快速检测结核分枝杆菌及其耐药性 61

第一节 噬菌体法快速检测结核分枝杆菌 61

第二节 噬菌体法快速检测结核分枝杆菌耐药性 72

参考文献 83

第五章 显微镜观察药敏技术及其应用 86

第一节 背景及原理 86

第二节 检测方法 87

第三节 应用情况 88

第四节MODS技术的评价与展望 94

参考文献 95

第六章 纳米技术快速检测结核分枝杆菌实验研究 97

第一节 技术原理 97

第二节 技术流程 98

第三节 应用情况 103

第四节 方法学评价和展望 105

参考文献 105

第七章 结核分枝杆菌药物依赖性研究 107

第一节 结核分枝杆菌生长的药物依赖性变异 107

第二节 结核分枝杆菌生长的药物依赖性变异的发生情况 108

第三节 药物依赖性变异结核分枝杆菌肺结核的临床特征 109

第四节 药物依赖性变异结核分枝杆菌的生物学特性及实验室诊断 110

参考文献 114

第八章 结核分枝杆菌感染对肺癌发生及预后的影响 116

第一节 肺结核是肺癌发生的高危因素 116

第二节 肺结核对肺癌预后的影响 117

第三节 基础研究有待深入问题 120

参考文献 121

第二篇 分子生物实验篇 124

第九章 结核分枝杆菌分子生物学研究进展 124

第一节 结核分枝杆菌分子研究进展 124

第二节 分子生物学技术的未来发展及其应用前景 130

参考文献 131

第十章 结核病分子生物学研究常用技术 134

第一节DNA凝胶电泳技术 134

第二节 核酸分子杂交技术 138

第三节 基因芯片技术 160

第四节 DNA测序技术 166

第五节 DNA指纹图谱技术 191

参考文献 196

第十一章 结核分枝杆菌核酸扩增技术及其应用 199

第一节 结核分枝杆菌核酸扩增技术 199

第二节 结核分枝杆菌RNA扩增技术 215

第三节 环介导恒温扩增技术 220

参考文献 225

第十二章 SAT恒温扩增技术在病原体诊断研究中的应用 228

第一节 SAT技术原理 228

第二节 SAT技术要点 229

第三节 SAT技术特点 230

第四节 SAT应用 231

参考文献 233

第十三章 SELEX技术及其在结核病检测中的应用 234

第一节 SELEX技术原理、特点及其基本技术路线 234

第二节 SELEX技术在结核分枝杆菌研究中的应用 237

第三节 用SELEX技术筛选结核分枝杆菌适配子的实验方案 238

参考文献 247

第十四章 焦磷酸测序技术快速检测结核分枝杆菌耐药性 249

第一节 检测原理 249

第二节 检测方法 252

参考文献 256

第十五章 变性高效液相色谱在结核分枝杆菌研究中的应用 258

第一节 变性高效液相色谱及其应用概况 258

第二节 变性高效液相色谱检测结核分枝杆菌耐药性 260

参考文献 264

第十六章 结核病分子流行病学研究 266

第一节 结核分枝杆菌基因分型相关分子生物学技术 267

第二节 以结核分枝杆菌基因分型为基础的分子流行病学研究设计 276

第三节 结核分枝杆菌基因分型在分子流行病学中的应用 279

参考文献 284

第十七章 非结核分枝杆菌的分子菌种鉴定 293

第一节 分枝杆菌菌种鉴定的主要靶基因序列 294

第二节 非结核分枝杆菌分子生物学鉴定方法 296

参考文献 303

第三篇 免疫实验篇 308

第十八章 结核病细胞免疫学研究进展 308

第一节 结核分枝杆菌的化学结构及其抗原 308

第二节 结核病免疫细胞 309

第三节 结核病免疫细胞因子 314

第四节 结核病免疫力评价 318

第五节 抗结核保护性免疫治疗 324

参考文献 338

第十九章 结核感染的特异性细胞免疫检测 342

第一节 检测原理 342

第二节 检测方法 343

第三节 应用评价及存在的问题 348

参考文献 349

第二十章 结核分枝杆菌抗原抗体检测研究 351

第一节 概述 351

第二节 结核分枝杆菌抗原检测 351

第三节 结核分枝杆菌抗体检测 352

第四节 结核抗原和抗体检测的临床应用 359

第五节 方法学评价和展望 365

参考文献 369

第二十一章 结核分枝杆菌蛋白抗原及其制备 374

第一节 结核分枝杆菌的蛋白抗原应用 374

第二节 结核分枝杆菌抗原的制备 377

参考文献 387

第二十二章 重组结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白的研究 388

第一节 结核病免疫学诊断用抗原的研究概况 388

第二节 结核分枝杆菌lhp-esat6融合基因原核表达载体的构建及表达 390

第三节 重组结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白在豚鼠感染模型的应用 396

参考文献 401

第二十三章 结核分枝杆菌TB-SA蛋白抗原的诊断应用 403

第一节 TB-SA蛋白抗原实验研究 403

第二节 试剂盒生产和质量研究 408

第三节 临床应用研究 411

参考文献 413

第二十四章 噬菌体展示技术在结核病免疫学检测中的应用 415

第一节 技术原理 415

第二节 技术流程 416

第三节 应用情况 423

第四节 方法学评价和展望 425

参考文献 426

第二十五章 结核分枝杆菌蛋白质组学研究 428

第一节 蛋白质组研究概况 428

第二节 结核分枝杆菌全细胞蛋白质组和亚细胞蛋白质组学研究 429

第三节 结核分枝杆菌及其他分枝杆菌的比较蛋白质组学研究 435

第四节 蛋白质组学研究在结核分枝杆菌致病机理的应用 436

第五节 药物蛋白质组学研究 438

第六节 结核分枝杆菌蛋白质组学在疫苗研究中的应用 439

第七节 结核分枝杆菌蛋白质组学研究的新发展 439

参考文献 445

第二十六章 结核病DNA疫苗的研究 451

第一节 结核病DNA疫苗的研究概况 451

第二节 ag85b、mpt64、ag85b-mpt64真核表达质粒的构建及表达研究 453

第三节 ag85b、mpt64和AM真核表达质粒诱导小鼠特异性免疫应答的研究 458

第四节 ag85b、mpt64及AM DNA疫苗对小鼠结核感染的免疫保护作用 462

第五节 基因疫苗对结核的免疫治疗作用的研究 470

参考文献 475

第二十七章 10-23脱氧核酶抗结核分枝杆菌感染的实验研究 478

第一节 结核分枝杆菌的潜伏感染与脱氧核酶 478

第二节 重组结核分枝杆菌异柠檬酸裂合酶及其抗体的制备 480

第三节 MTB 10 - 23 DRz的设计及其在无细胞体系中切割活性的鉴定 485

第四节 10-23 DRz对MTB ICL表达及其在巨噬细胞中存活的影响 489

第五节 10-23 DRz对MTB感染小鼠的影响 495

参考文献 499

第二十八章 颗粒溶素/IL-12重组耻垢杆菌治疗小鼠结核病研究 501

第一节 颗粒溶素、IL-12和耻垢分枝杆菌 501

第二节 携带人gls和鼠单链IL-12基因的真核共表达质粒pZM03的构建和鉴定 503

第三节 靶向递送pZM03重组耻垢分枝杆菌的构建及其功能的鉴定 513

第四节 颗粒溶素/IL-12重组耻垢分枝杆菌对小鼠结核病治疗作用的实验研究 520

参考文献 525

第四篇 实验室建设与安全篇 528

第二十九章 结核分枝杆菌实验危害程度风险评估探讨 528

第一节 危害程度分类 528

第二节 背景资料 529

第三节 实验室实验活动及其危险性与预防措施 534

第四节 工作人员素质 540

参考文献 540

第三十章 结核病实验室基本设施建设 541

第一节 基础实验室的实验设备配置和实验室布局 541

第二节 高级实验室的实验设备配置和实验室布局 541

第三节 结核病实验室的生物安全性 542

第三十一章 结核病实验研究设备及网站简介 547

第一节 结核病实验研究常用设备介绍 547

第二节 结核病研究有关的网络资源 551

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