PCR技术实验指南 原著第2版PDF格式文档图书下载

目录 1

第1篇 PCR导论 1

1 建立一个PCR实验室 4

2 PCR残留污染的处理：一种酶学策略 12

3 高保真PCR酶 17

4 PCR的最优化和常见问题解析 29

5 富含GC片段的PCR扩增 35

6 精确扩增大片段的技巧 43

7 PCR引物设计 49

8 PCR扩增DNA的非放射性循环测序 60

第2篇 样品的制备 67

9 DNA的纯化 70

10 RNA的纯化 93

11 激光捕获微分离技术原位定位基因表达 107

12 克服PCR受抑制的策略 119

第3篇 RT-PCR方法 131

13 相对定量RT-PCR和竞争定量RT-PCR内对照的使用 133

14 四种实时PCR检测系统的比较：Bio-Rad I-Cycler、ABI 7700、Roche LightCycler、the Cepheid Smartcycler 150

15 定量PCR的新技术 159

16 RNA的扩增：用镁激活的热稳定DNA聚合酶进行高温反转录和DNA扩增 167

第4篇 PCR产物的检测：专门应用 175

17 杂合性的丢失：一种鉴定肿瘤基因组上染色体区段缺失的多重PCR方法 177

18 单链构象多态性分析 189

19 逆转录酶原位PCR 201

20 灵敏快速的突变检测方法——错配位点的固相化学切割法 213

第5篇 用PCR分析基因的差异表达 225

21 PCR在基于微阵列的基因表达分析中的应用 227

22 利用抑制性消减杂交技术鉴定差异表达的基因 240

23 基因表达分析中的荧光mRNA差异显示技术 266

第6篇 用PCR进行克隆 285

24 以PCR为基础的文库筛选方法 287

25 经典RACE（cDNA末端快速扩增）法的改进 293

26 用PCR合成和分析DNA文库 321

第7篇 PCR产物的克隆 333

27 克隆PCR产物的策略 335

28 PCR产物双向和定向克隆 349

29 核糖克隆：用含有一个核糖核苷酸末端的PCR引物进行DNA克隆和基因构建 365

第8篇 利用PCR进行诱变 373

30 诱变PCR 375

31 快速PCR定点突变 381

32 利用PCR来突变和合成新的重组基因 388

33 流线型基因装配PCR 395

附录1 专利 402

附录2 在PCR中使用的寡核苷酸的修饰 404

附录3 注意事项 407

附录4 供应商 416

索引 417

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