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医学细胞生物学实验技术

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医药卫生

图书介绍:本书根据教育部有关加强学生素质教育和培养创新人才的要求,本实验指导注重实验内容的更新,减少部分验证性或演示性实验,开设综合性、设计性(探索性)实验,在实验内容上进一步明确层次。将实验课分为:①基础性实验:着重培养学生的动手能力,分析问题和解决问题的能力,培养学生严谨的科学态度,以基本技能和基本操作为主。②综合性实验:综合各学科的内容,着重培养学生应用新知识、新技术的能力和科学思维的能力。③设计性实验(或称探索性实验):学生在教师的指导下进行选题、查阅文献资料、设计实验、独立完成相关实验研究、总结、最后完成论文,目的是初步培养学生科学研究的能力,为开展科学研究和完成毕业论文打下基础。本书强化实验技能的训练和科学思维方法的培养,并充分采用现代教育技术设备辅助实验课进行教学,提高学生的动手能力和解决问题的能力。考虑到各个院校所能开设的实验内容不同,同种试剂实验涉及到2个以上实验内容时,为避免重复和方便查找,其配制方法列在书后的相应附录中。本书是一本实用性强的细胞生物学与医学遗传学实验教材,可作为不同实验基础条件的综合大学医学院和医学院校的本科生及研究生使用,也可作为从事生命科学、医学和农学工

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图书介绍

第一章 显微镜技术 1

实验一 光学显微镜技术 1

一、普通光学显微镜的结构和使用 3

二、特殊光学显微镜的原理、结构与应用 8

实验二 显微摄影技术 15

一、照相显微镜各部件的选择及应用 15

二、感光片(胶卷)的选择 16

三、滤光片的选择 17

四、感光片的暗室加工 18

实验三 电子显微镜技术 20

一、透射电镜的结构和使用 22

二、扫描电镜的结构和使用 23

三、电镜样品制备技术和方法 24

四、电镜样品的观察、识别和分析 25

第二章 细胞的形态结构与细胞器 26

实验四 细胞的形态结构与细胞器的观察 26

一、细胞形态结构的观察 26

二、细胞器的观察 30

三、细胞的超微结构 34

四、细胞的显微测量 36

实验五 死活细胞的鉴别与分离 38

一、化学染色法鉴别死活细胞 39

二、荧光染色法鉴别死活细胞 40

三、死活细胞分离 40

实验六 细胞组分(细胞器)的分级分离 41

一、细胞核的分离提取 42

二、高速离心分离提取线粒体 43

第三章 细胞生理与细胞化学 44

实验七 细胞的生理活动 44

一、细胞的吞噬活动 44

二、草履虫纤毛运动及食物泡的形成 45

三、暗视野观察细胞的纤毛和鞭毛运动 45

四、细胞膜的渗透性实验 46

五、细胞的凝集反应 47

实验八 细胞化学 48

一、普通细胞化学 49

二、酶细胞化学 50

三、荧光细胞化学 51

四、免疫细胞化学 52

第四章 综合性实验 53

实验九 染色体标本的制备及观察 53

一、骨髓染色体标本的制备及观察 53

二、人类染色体标本制备技术 56

三、其他组织细胞的染色体标本制备 59

实验十 细胞增殖与细胞凋亡 63

一、有丝分裂标本制备与观察 65

二、减数分裂标本制备与观察 66

三、细胞凋亡的检测 70

第五章 细胞培养与细胞工程技术 72

第一节 培养细胞的生存条件 72

一、营养物质 73

二、细胞培养要求的环境 73

三、细胞培养基本设备和用品的功能简介 74

第二节 细胞培养的基本技术 76

第三节 体外培养细胞的取材方法与原代细胞培养 76

一、取材与细胞分散 76

二、原代细胞培养 77

三、传代细胞培养 78

第四节 培养细胞的生长特性与形态分型 78

一、培养细胞的生长与增殖 78

二、培养细胞生长和增殖的观察 79

第五节 培养细胞的计数、生长曲线与分裂指数测定 80

第六节 培养细胞的冻存、复苏与运输 80

一、影响冻存细胞活性的因素 80

二、培养物的运输 81

第七节 细胞系或细胞株的建立 81

实验十一 动物细胞培养及相关实验技术 82

一、实验室中无菌操作技术 83

二、细胞的原代培养技术 83

三、细胞的传代培养技术 85

四、体外培养细胞的计数和活力测定 86

五、体外培养细胞的冻存与复苏技术 87

实验十二 细胞融合与细胞核移植技术 89

一、细胞融合技术 90

二、细胞核移植技术 91

第六章 细胞遗传学实验技术 94

实验十三 人类性染色质标本制备技术 94

一、X染色质标本制备与观察 95

二、Y染色质标本制备与观察 96

实验十四 人类染色体显带与高分辨显带技术 97

一、人类染色体G显带标本制备 98

二、人类染色体高分辨显带技术 100

三、人类染色体C显带标本制备 101

四、人类染色体Q显带标本制备 103

五、人类染色体R显带标本制备 104

六、人类染色体T显带标本制备 105

七、人类染色体NOR带标本制备 105

实验十五 核型分析与人类异常核型观察 107

一、人类正常非显带染色体核型分析 107

二、人类染色体G显带核型分析 110

三、人类异常核型的观察和分析 113

实验十六 离体细胞染色体畸变检测方法及技术 115

一、受试物对细胞增殖的半数抑制剂量测定 115

二、试验设计 116

三、染色体畸变标本制备及观察 116

实验十七 人类脆性X染色体标本制备 117

一、外周血淋巴细胞脆性X染色体标本制备 118

二、绒毛细胞脆性X染色体标本制备 119

三、羊水细胞脆性X染色体标本制备 119

四、脆性X染色体标本观察 119

实验十八 人类SCE和微核检测技术 120

一、SCE标本制备与观察 121

二、微核检测技术 123

实验十九 荧光原位杂交技术 126

第七章实验设计的原理与方法 130

第一节实验设计的概念、特点和分类 130

第二节实验设计的基本要素 130

一、确定处理因素 130

二、针对要求选取实验对象和样本 130

三、实验效应 131

第三节 实验设计的基本原则 131

一、科学性原则 131

二、对照性原则 131

三、重复原则 132

四、随机化与均衡原则 133

五、单因子变量原则 133

六、标准化原则 133

第四节常用的实验设计思路 133

第五节实验设计的基本内容与方法 134

一、实验设计的基本内容 134

二、常用的实验设计方法 134

第八章细胞生物学实验设计与选题 136

第一节设计性实验及其在人才培养中的作用 136

第二节设计性实验的操作过程 138

第三节实验设计的实例分析 140

一、范例Ⅰ“细胞生长需要特定的环境条件”实验设计实例 140

二、范例Ⅱ利用胸腺嘧啶和秋水仙素获得同步培养的细胞 141

第四节可供实验设计选题目录 142

参考文献与网站 145

附录Ⅰ 实验器械的清洗和处理 147

附录Ⅱ 实验室常用灭菌和除菌方法 150

附录Ⅲ 细胞生物学与遗传学实验常用试剂的配制 152

附录Ⅳ 常用培养基和抗生素的配制 162

附录Ⅴ 离心机转速与离心力的列线图(换算) 164

附录Ⅵ 流式细胞仪分析技术 165

附录Ⅶ 生物样品的储存、邮送与实验室安全 169

附录Ⅷ 常用生物学数据 172

附录Ⅸ 实验常用软件和数据库介绍 174

附录Ⅹ 有关细胞生物学和医学遗传学的主要网站 183

附录Ⅺ 人类某些遗传性状(疾病)的调查分析 185

附录Ⅻ 系谱分析 189

附录XIII 皮纹分析 193

附录XIV 遗传病的发病风险估计 199

附录XV 缩略语表 206

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