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第一章　概论 1

第一节　生物显微技术的内容和应用 1

第二节　生物显微技术的发展简史 1

一、16世纪的显微技术 2

二、17世纪的显微技术 2

三、18世纪的显微技术 3

四、19世纪的显微技术 4

五、20世纪的显微科学 5

第三节　现代生物显微技术 6

一、透射电子显微镜 6

二、扫描电子显微镜 6

三、近场光学显微镜 7

四、X射线显微技术 7

五、扫描探针技术 7

复习思考题 9

第二章　生物制片的基本原理 10

第一节　材料的采集与处理 10

一、植物材料的采集与处理 10

二、动物材料的采集与处理 11

第二节　固定和固定液 12

一、固定 12

二、固定液 12

三、固定时的注意事项 19

第三节　冲洗与脱水 20

一、冲洗 20

二、脱水 21

第四节　透明与透明剂 23

一、透明 23

二、透明剂 24

第五节　包埋与包埋剂 25

一、包埋 25

二、包埋剂 25

第六节　切片与粘片 26

一、切片 26

二、粘片 29

第七节　染色原理及染色剂 29

一、染色原理 30

二、染色剂 31

第八节　封藏与封藏剂 37

复习思考题 38

第三章　常用生物制片的基本方法 39

第一节　徒手切片法 39

一、概述 39

二、徒手切片法常用器具 39

三、徒手切片的方法 39

四、注意事项 40

第二节　石蜡切片法 40

一、概述 40

二、石蜡切片常用器具及药品 40

三、石蜡切片的方法 40

四、石蜡切片的注意事项 45

五、石蜡切片及其染色程序总结 46

第三节　冰冻切片法 47

一、概述 47

二、冰冻切片的主要仪器和用具 48

三、冷冻切片的方法 48

四、注意事项 50

第四节　半薄切片法 51

一、概述 51

二、半薄切片常用器具及药品 51

三、半薄切片的方法 51

四、塑料厚切片法 53

第五节　非切片制片法 54

一、整体制片法 54

二、离析法 57

三、压片法 58

复习思考题 63

第四章　常用植物制片技术 64

第一节　整体封片技术 64

一、地木耳装片 64

二、水绵装片 65

三、葫芦藓整体装片 66

四、葫芦藓原丝体装片 66

五、马尾松花粉粒装片 67

六、百合花粉粒萌发装片 68

七、禾本科植物叶表皮装片 69

八、蚕豆叶下表皮装片示气孔 69

九、洋葱鳞片叶表皮装片 70

第二节　组织器官制片技术 71

一、玉米花药减数分裂制片（涂抹法） 71

二、洋葱根尖细胞压片法示有丝分裂 72

三、导管分离装片 73

四、柿胚乳细胞胞间连丝的制片法 73

五、蚕豆石蜡制片示线粒体 75

六、桑石蜡制片示皮孔 76

七、橘果皮分泌腔制片 76

八、洋葱根尖纵切石蜡制片示细胞有丝分裂 77

九、地衣原植体横切石蜡制片 78

十、地钱生殖托纵切石蜡制片 79

十一、葫芦藓精子器和颈卵器纵切石蜡制片 79

十二、毛茛根初生构造横切石蜡制片 80

十三、木槿根的次生构造横切石蜡制片 81

十四、湖南山核桃花序纵切石蜡制片 81

十五、木材材料制片法 82

十六、三叶草叶片横切石蜡制片 83

十七、百合花药横切石蜡制片 83

十八、百合子房横切石蜡制片 84

十九、荠菜角果纵切石蜡制片 84

二十、葡萄胚纵切 84

复习思考题 85

第五章　常用动物组织制片法 86

第一节　涂片法 86

一、Giemsa染色法 86

二、Wright染色法 87

三、Giemsa-Wright混合染色法 87

第二节　无丝分裂（膀胱印片）法 87

第三节　间皮硝酸银染色制片法 88

第四节　纤维性结缔组织与细胞的制片术 88

一、胶原纤维 88

二、弹性纤维 91

三、网状纤维 92

四、巨噬细胞 95

五、浆细胞 96

六、肥大细胞 96

第五节　软骨和骨 98

一、软骨 98

二、骨 99

第六节　血管注射技术 102

第七节　消化器官 104

一、常规苏木精-伊红染色法 104

二、过碘酸Schiff反应（PAS） 105

三、阿利新蓝染色法 105

四、黏液卡红（mucicarmin）染色法 105

五、小肠潘氏细胞染色法 106

六、闭锁堤 106

七、消化管的内分泌细胞 106

八、肠肌丛（Auerbach神经丛）镀银法 109

九、肝血管双色注射 109

十、肝血窦内星状细胞（Kupffer细胞）活体注射显示法 109

十一、肝细胞间的胆小管显示法 110

十二、肝储脂细胞显示法 111

十三、胰岛A细胞、胰岛B细胞及胰岛D细胞显示法 111

第八节　呼吸器官 113

一、取材 113

二、固定 114

三、嗅细胞及神经显示法 114

四、肺的弹性纤维染色法 114

五、肺的网状纤维染色法 114

六、肺泡毛细血管网注射显示法 114

七、肺泡上皮镀银法 114

八、肺泡Ⅱ型细胞显示法（McNary） 115

九、分离气管上皮细胞法 115

第九节　泌尿器官 115

一、肾的常规染色 116

二、球旁细胞颗粒染色 116

第十节　生殖器官 117

一、精液内的精子检测 117

二、三色法 118

三、巴氏精液涂片染色法 118

四、精子核的苯胺蓝染色法 119

五、精子核的萘醌磺酸钠染色法 120

六、精子顶体的结晶紫染色法 120

七、精子顶体的酶活性检测——底膜法 121

八、动物精子头部膜的超薄切片改进染色法 121

第十一节　全鸡胚制片法 122

复习思考题 123

第六章　常用微生物制片技术 124

第一节　细菌的制片技术 124

一、简单染色法 124

二、革兰氏染色法 125

三、芽孢染色法 126

四、荚膜染色法 127

五、鞭毛染色法 128

第二节　放线菌的制片技术 130

一、插片法 130

二、印片染色法 131

三、凹载玻片培养法 131

第三节　真菌的制片技术 132

一、水浸制片观察霉菌的菌体形态 132

二、根霉接合孢子的培养与观察 133

三、酵母菌子囊孢子的培养与观察 134

四、伞菌子实体的压片观察 135

复习思考题 135

第七章　植物染色体技术 136

第一节　植物染色体常规压片技术 136

一、取材 136

二、预处理 138

三、压片法 142

四、低渗法 146

五、减数分裂的制片 147

第二节　植物染色体分带技术 148

一、Giemsa分带 148

二、荧光分带 160

三、显带机制 161

第三节　植物染色体银染色技术 163

一、银染色技术 163

二、染色体的银染色原理 163

三、染色体银染色法分类及技术流程 165

第四节　植物染色体核型和带型分析 170

一、核型分析的意义 170

二、核型分析 171

三、染色体图像分析 182

复习思考题 184

第八章　原位杂交 185

第一节　原位杂交的基本原理 185

第二节　染色体原位杂交技术 186

一、植物核DNA的提取 186

二、探针及标记 190

三、染色体制备 197

四、杂交前处理 200

五、杂交反应 201

六、杂交后处理 203

七、杂交信号的检测 203

八、复染和封片 206

九、观察和摄影 207

十、载玻片的再杂交 207

十一、对照 207

十二、疑难解答 208

第三节　RNA原位杂交技术 209

一、取材和固定 209

二、标本制备 210

三、探针及标记 210

四、杂交前处理 211

五、杂交反应 211

六、杂交后的处理 212

七、杂交信号的检测和对比染色 212

八、RNA原位杂交结果的评定 212

第四节　原位杂交的应用 213

一、植物基因的染色体物理作图 213

二、染色体识别、分子核型构建和异源多倍体物种进化等 214

三、减数分裂染色体行为的分析和外源染色体或染色体片段的检测 214

四、基因组的空间分布 215

五、植物基因表达的规律 215

六、荧光原位杂交技术用于微生物多样性和原位功能研究 217

复习思考题 217

第九章　生物显微化学 218

第一节　概述 218

一、生物显微化学的技术要求 218

二、生物显微化学的研究内容 219

三、显微化学的研究方法 219

四、显微化学一般注意事项 220

第二节　无机物质的鉴定 221

一、钙的鉴定与定位 221

二、镁的鉴定与定位 221

三、铁的鉴定与定位 222

四、磷酸盐的鉴定与定位 223

五、草酸钙结晶的鉴定与定位 223

第三节　有机物质的鉴定 223

一、糖类的鉴定与定位 224

二、脂类的鉴定与定位 230

三、蛋白质的鉴定与定位 232

四、核酸的鉴定与定位 236

五、酶类的鉴定与定位 237

复习思考题 242

第十章　生物显微镜 243

第一节　光学显微镜的种类及性能 243

一、生物显微镜 244

二、荧光显微镜 248

三、体视显微镜 254

四、倒置显微镜 256

五、相差显微镜 258

六、激光共聚焦显微镜 261

第二节　显微镜常用技术参数与专业名词 264

一、显微镜常用技术参数 264

二、显微镜常用专业名词 267

复习思考题 271

第十一章　电子显微技术 272

第一节　透射电子显微镜结构和原理 272

一、电子光学部分 272

二、真空排气部分 274

三、电气系统 275

第二节　扫描电子显微镜的结构和原理 276

一、电子光学系统 276

二、信号检测及显示系统 277

三、真空系统和电气系统 278

第三节　透射电子显微镜的生物样品制备技术 278

第四节　生物样品的负染色技术 286

一、负染色样品的制备 286

二、负染色液的配制 287

三、负染色的操作方法 288

四、影响负染色效果的因素 288

第五节　扫描电子显微镜的生物样品制备技术 289

一、取材 289

二、前固定 290

三、清洗 290

四、后固定 290

五、脱水 291

六、更换中间液 291

七、干燥 291

八、样品的粘贴与安置 293

九、镀膜 293

十、样品观察 294

第六节　扫描探针显微镜 297

一、扫描隧道显微镜 297

二、原子力显微镜 298

复习思考题 299

第十二章　生物显微摄影及显微图像分析系统 300

第一节　生物显微摄影 300

一、普通光学显微摄影 300

二、数码显微摄影 300

三、显微图像分析系统 301

第二节　普通光学显微摄影技术 301

一、光学显微摄影装置 301

二、光学显微摄影的一般工作步骤 302

三、洗印和放大 307

第三节　生物显微图像分析系统 310

一、生物显微图像分析系统的类型和功能 310

二、生物显微图像分析系统的组成部分 310

三、图像分析的主要流程 312

四、显微图像分析中的数字图像基础知识 312

五、几个主要的显微图像分析系统软件简介 314

复习思考题 326

主要参考文献 327

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