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第一篇 概论 1

第一章 实验室概述 2

第二章 基本实验操作 5

第三章 常用仪器的使用 10

第四章 实验报告撰写及要求 16

第二篇 生物化学与分子生物学技术 19

第五章分光光度技术 20

第一节 分光光度技术的基本原理 20

第二节 分光光度计的组成与结构 22

第三节 分光光度技术的应用 24

第六章 电泳技术 26

第一节 电泳的基本原理 26

第二节 影响电泳分离的因素 26

第三节 电泳的类型 28

第四节 几种常用电泳简介 29

第七章 层析技术 35

第一节 层析原理 35

第二节 常用的层析方法 42

第八章 离心技术 45

第一节 离心技术的基本原理 45

第二节 离心机的类型 46

第三节 制备型离心的分离方法 47

第四节 离心操作的注意事项 48

第九章 聚合酶链反应技术 50

第一节PCR技术的基本原理、特点及影响因素 50

第二节PCR的引物设计 52

第三节 几种常用的PCR衍生技术 53

第四节PCR技术的主要应用 53

第五节PCR实验操作的注意事项 54

第十章 印迹技术 56

第十一章 重组DNA技术 59

第一节 重组DNA技术的相关概念 59

第二节 重组DNA技术的基本原理及操作步骤 60

第三节 重组DNA技术在医学领域的应用 63

第十二章外源蛋白质在原核细胞的表达与分离纯化 65

第十三章 荧光标记技术 68

第一节 荧光现象 68

第二节 荧光探针 70

第三节 荧光标记样品的检测 71

第十四章RNA干扰技术 78

第一节RNA干扰的作用机制 78

第二节RNA干扰技术的应用 80

第十五章 生物芯片技术 82

第一节 基因芯片 82

第二节 蛋白质芯片 84

第十六章 基因多态性研究 86

第十七章 双向电泳 90

第十八章 细胞培养与细胞转染技术 93

第一节 细胞培养技术 93

第二节 细胞转染技术 97

第十九章 蛋白质三维结构建模 99

第一节蛋白质结构的确定与预测 99

第二节 蛋白质结构预测实例 101

第三篇 生物化学与分子生物学实验 111

第二十章 基础性实验 112

实验1蛋白质的呈色反应、沉淀现象观察及等电点的测定 112

实验2蛋白质含量的测定 115

实验3丙二酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用 123

实验4红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性测定 125

实验5血清丙氨酸转氨酶（ALT）活性测定 129

实验6碱性磷酸酶米氏常数测定 132

实验7凝胶柱层析分离蛋白质 134

实验8聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离血清蛋白 136

实验9糖化血红蛋白的测定 139

实验10血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 143

实验11血红蛋白的醋酸纤维素薄膜电泳 145

实验12血糖测定 146

实验13胰岛素、肾上腺素对家兔血糖浓度的影响 152

实验14饥饿和饱食对小鼠肝糖原含量的影响 153

实验15 血清总胆固醇测定 155

实验16质粒DNA的提取、浓度测定和纯度鉴定 158

实验17酵母RNA的成分鉴定 160

实验18 λ DNA的限制性内切酶消化及琼脂糖凝胶电泳分析 161

实验19 PCR扩增G6PD基因外显子11-12片段 163

实验20维生素C的测定 164

实验21尿中酮体的检出 166

实验22血清尿素氮测定 167

实验23四苯硼钠直接比浊法测定血清钾离子浓度 171

第二十一章 综合性实验 173

实验1 SDS-PAGE测定蛋白质的表观分子量 173

实验2血红蛋白的等电聚焦分离及其等电点测定 177

实验3血清蛋白的盐析及清/球比值的测定 179

实验4血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳分离及定量测定 182

实验5酶的特异性及温度、pH、激活剂、抑制剂对酶活性的影响 185

实验6肽的N-末端氨基酸分析 188

实验7小鼠肝细胞核的分离、纯化与鉴定 190

实验8等电聚焦电泳技术分离乳酸脱氢酶同工酶 193

实验9糖的硅胶G薄层层析分析鉴定 195

实验10动脉硬化指数的计算 197

实验11 pThioHis （ A）-G6PD重组表达质粒的鉴定 199

实验12 G6PD重组酶的诱导表达、分离及比活性测定 202

实验13 ATP、 ADP和NADPH对G6PD酶促反应的影响 206

实验14大鼠脑组织肌酸、磷酸肌酸和腺苷酸的同步测定 211

实验15尿儿茶酚胺的测定 213

实验16小鼠血清IgG的Western blotting分析 216

实验17真核细胞基因组DNA的提取、定量和纯度测定 221

实验18小鼠基因组DNA的Southern blotting分析 223

实验19 pMD 19-G6PD重组子的蓝白斑筛选及限制酶切鉴定 227

实验20小鼠脑组织总RNA提取与RT-PCP获取真核基因片段 231

实验21小鼠PKCε基因的克隆、鉴定及其6His融合蛋白质的大肠杆菌表达和纯化 236

第二十二章 创新设计实验 242

实验1乙醛脱氢酶突变基因型的检测 242

实验2针刺“足三里”穴对家兔血糖浓度双向调节作用的观察 244

实验3小鼠PKCε相互作用蛋白质的捕获、鉴定 246

实验4巢式MSP法检测胃癌细胞p16基因的甲基化 249

实验5细胞凋亡检测（PARP的蛋白酶解） 250

实验6小鼠肝总蛋白质的双向电泳分离 252

实验7人血浆同型半胱氨酸的测定 256

实验8自毁容貌综合征的生化与分子生物学分析 257

实验9 G6PD缺陷的诊断及其发病的分子基础 258

附录一 生物化学与分子生物学常用数据库和软件 261

附录二 生物化学与分子生物学常用试剂和培养基的配制方法 263

附录三 生物化学与分子生物学实验常用缩略语 266

附录四 生物化学与分子生物学实验常用词英中文对照 269

参考文献 277

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