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1 绪论 1

1.1 发酵工程的基本概念和范畴 1

1.2 国外发展趋势 1

1.3 国内发酵工业的现状 3

1.4 发酵工业发展的趋势 3

2 发酵工程实验的基本知识 4

2.1 发酵工程实验室规范 4

2.2 发酵工程实验室的常用仪器 9

实验2-1 高速冷冻离心机的使用方法2.3 发酵工程实验的常规操作技术 22

实验2-2 常用培养基的制备、灭菌与消毒实验2-3 用亚硫酸钠氧化法测定气液接触过程的体积传质系数kLa 34

实验2-4 微生物反应器的反应性能试验 36

实验2-5 停留时间分布的测定 38

3 发酵工程实验中常见的分析技术 42

3.1 化学分析法 42

实验3-1 原料粗淀粉含量的测定（旋光法） 42

实验3-2 还原糖的测定（费林法） 43

实验3-3 总蛋白含量的测定（Folin-酚试剂法） 45

实验3-4 总氨基酸（氨态氮）含量的测定（甲醛滴定法） 47

实验3-5 α-淀粉酶活力的测定（目视比色法） 48

实验3-6 糖化酶活力的测定 49

实验3-7 蛋白酶活力的测定 51

3.2 仪器分析法 53

实验3-8 紫外分光光度计法测定核酸含量 56

实验3-9 薄层层析法测定果品制品中的红曲色素 60

实验3-10 原子吸收法测定铅含量 64

实验3-11 高效液相色谱法测定功能性红曲中的麦角甾醇 70

实验3-12 气相色谱法测定山梨酸、苯甲酸含量 76

4 发酵微生物的菌种选育 77

4.1 自然选育技术 77

4.2 诱变育种技术 77

4.3 代谢调控育种技术 78

4.4 杂交育种技术 78

4.5 基因工程育种技术 78

实验4-1 土壤样品中细菌的分离 79

实验4-2 大肠杆菌紫外诱变及抗性突变菌株的筛选 81

实验4-3 亚硝基胍诱变与细菌营养缺陷型突变株的筛选 84

实验4-4 酵母原生质体融合育种 86

实验4-5 质粒DNA的小量制备及电泳检测 88

实验4-6 大肠杆菌感受态的制备与质粒转化实验 91

5 发酵酒及其感官评定 93

5.1 啤酒的发展历史 93

5.2 啤酒的分类及其风味特点 94

实验5-1 啤酒辅料酿造特性的研究 95

实验5-2 啤酒大麦小型制麦实验 97

实验5-3 协定糖化法及麦芽指标分析 98

实验5-4 糖化工艺及外加酶糖化法研究 101

实验5-5 50 L小型糖化设备麦汁制造实验实验5-6 1000 L酿造设备啤酒酿造实验 102

实验5-7 E.B.C管式发酵实验实验5-8 啤酒酵母小滴分离实验 105

实验5-9 啤酒酵母极限发酵度的测定与比较 106

实验5-10 啤酒酵母凝聚性的测定 107

实验5-11 啤酒保质期的预测 109

实验5-12 硫代巴比妥酸法（TBA）测定羰基化合物 111

实验5-13 啤酒风味保鲜期的预测 113

实验5-14 高级醇酯静态顶空气相色谱检测方法 114

实验5-15 啤酒感官鉴定和啤酒风味品尝实验 115

5.3 黄酒 121

实验5-16 黄酒中酒精度含量的测定实验5-17 廉爱农法检测甜型和半甜型黄酒的总糖含量 122

实验5-18 铁氰化钾滴定法测定干型和半干型黄酒中的总糖含量 123

实验5-19 黄酒非糖固形物含量的测定 125

实验5-20 黄酒中总酸和氨基酸态氮的测定实验5-21 酵母细胞数、芽生率和死亡率的测定 126

实验5-22 实验室规模的黄酒酿造实验 128

实验5-23 甜酒酿的制作 130

实验5-24 从发酵醪液中分离优良的黄酒酵母菌 130

实验5-25 黄酒的品评 131

5.4 葡萄酒 133

实验5-26 酒精计法测定葡萄酒的酒精度 133

实验5-27 费林滴定法测定葡萄酒和葡萄汁中总糖和还原糖实验5-28 电位滴定法测定葡萄汁和葡萄酒中的总酸含量实验5-29 实验室规模的葡萄酒酿造实验 133

实验5-30 直接碘量法测定葡萄酒中的游离二氧化硫含量 135

实验5-31 直接碘量法测定葡萄酒中的总二氧化硫含量 137

实验5-32 葡萄酒的品评 139

6 厌氧发酵产品 139

6.1 厌氧发酵主要产品及其应用 139

6.2 厌氧发酵工艺 140

实验6-1 酵母菌的形态结构观察及测微技术实验6-2 酒精发酵液中酵母菌数量的测定实验6-3 接种技术实验6-4 常规酒精发酵的过程观察 141

实验6-5 酒精发酵的常规检测 142

实验6-6 不同原料酒精发酵的比较 143

实验6-7 不同料水比酒精发酵 144

实验6-8 30 L发酵罐酒精发酵 145

实验6-9 丙酮丁醇发酵实验 146

7 酶制剂 148

7.1 酶制剂的发展概况 148

7.2 酶制剂的分类 148

7.3 酶制剂的应用 149

实验7-1 α-淀粉酶产生菌的筛选实验7-2 中温α-淀粉酶的摇瓶发酵实验 150

实验7-3 紫外线诱变选育α-淀粉酶高产菌株实验7-4 黑曲糖化酶产生菌的分离实验7-5 糖化酶的发酵和提取实验实验7-6 双酶法制备淀粉糖 151

实验7-7 真菌α-淀粉酶固态发酵实验实验7-8 吸附法制备固定化脂肪酶 154

实验7-9 固定化脂肪酶催化非水相合成己酸乙酯 156

实验7-10 纤维素酶降解壳聚糖 157

8 氨基酸 159

8.1 氨基酸工业的概况 159

8.2 氨基酸的分类 159

8.3 氨基酸的生产方法 160

实验8-1 谷氨酸产生菌的分离 160

实验8-2 L-赖氨酸摇瓶发酵 160

实验8-3 抗反馈调节突变型——赖氨酸高产菌株的选育实验8-4 固定化细胞法生产L-丙氨酸 162

实验8-5 离子交换法制备γ-氨基丁酸 165

实验8-6 ε-聚赖氨酸生产菌的筛选 165

9 有机酸 168

9.1 有机酸的分类 168

9.2 有机酸的发展概况 168

9.3 有机酸的生产方法 169

实验9-1 乳酸摇瓶发酵实验 169

实验9-2 L-乳酸5 L发酵罐发酵实验 169

实验9-3 柠檬酸摇瓶发酵实验 172

实验9-4 柠檬酸25 L罐发酵实验 172

实验9-5 苹果酸发酵实验 173

10 微生物药物 175

10.1 微生物制药的概论 175

10.2 微生物药物的分类 176

实验10-1 乳酸链球菌素产生菌的筛选实验10-2 紫外线诱变原生质体筛选四环素高产菌株 177

实验10-3 微生物发酵法产L-精氨酸实验10-4 发酵法制备维生素B2 179

实验10-5 发酵法制备硫酸庆大霉素 181

实验10-6 微生物法生产肌苷酸 181

11 基因工程产品 184

11.1 基因工程产品发展的概况 184

11.2 基因工程产品的主要种类 185

11.3 基因工程产品的应用 185

实验11-1 芽孢杆菌植酸酶基因在毕赤酵母中的表达 185

实验11-2 植酸酶基因工程菌毕赤酵母GS115 phyc发酵条件的优化实验11-3 重组毕赤酵母生产植酸酶的流加策略 192

实验11-4 人白细胞介素7重组蛋白基因在大肠杆菌中的克隆与表达实验11-5 异源表达人白细胞介素7重组蛋白基因大肠杆菌发酵的优化实验11-6 少根根霉脂肪酶在枯草芽孢杆菌中的表达 194

实验11-7 少根根霉脂肪酶基因在重组枯草芽孢杆菌表达条件的优化 194

12 其他新型发酵产品 199

12.1 功能性糖及其衍生物 199

12.2 新型发酵饲料 199

12.3 新型发酵饮料 200

实验12-1 灵芝发酵生产灵芝多糖 200

实验12-2 秸秆饲料的制备方法 201

实验12-3 南瓜乳酸发酵饮料的制备方法 202

13 微生物转化 204

13.1 微生物转化的概述 204

13.2 微生物转化的方法 204

13.3 微生物转化的应用 205

实验13-1 微生物转化葡萄糖生产乳酸实验13-2 酿酒酵母固定化法生产乙醇实验13-3 两相体系中微生物转化法制备依西美坦 206

实验13-4 固定化黄色短杆菌生产苹果酸实验13-5 静息细胞转化法合成天麻素 208

实验13-6 嗜麦芽黄单胞菌渗透细胞生物转化生产熊果苷 209

实验13-7 羰基还原酶的生物转化反应实验 211

14 固态发酵 213

实验14-1 固态发酵中的微生物生长 213

实验14-2 固态发酵的生物量的测定 214

实验14-3 α-淀粉酶固态发酵生产 215

实验14-4 固态发酵蛋白酶 216

实验14-5 纤维素原料的固态酒精发酵 217

15 发酵产品的提取与精制 219

15.1 发酵工程下游技术的概述 219

15.2 发酵产品提取与精制的单元操作 219

实验15-1 淀粉脱支酶的分离精制 220

实验15-2 从发酵液中制备高纯乳酸 223

实验15-3 冬虫夏草菌丝体发酵液中多糖的分离纯化 224

实验15-4 链霉素的分离纯化 226

实验15-5 红霉素的分离纯化 227

16 发酵设计性实验 229

16.1 设计性实验的组织与实施 229

16.2 发酵设计性实验的实例 230

实验16-1 支链氨基酸转氨酶产酶微生物的筛选、鉴定和发酵 232

实验16-2 α-酮戊二酸的发酵、提取和产品检测 233

实验16-3 天然生物活性物质的分离纯化和检测 234

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