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第一单元 临床微生物实验室的生物安全防护与实验室守则 1

一、临床微生物实验室的生物安全防护 1

二、临床微生物教学实验室守则 1

三、实验室意外应急处理措施 2

第二单元 细菌检验基本技术 4

实验一 细菌形态检查 4

一、不染色标本细菌检查 4

二、细菌涂片制作和革兰染色 4

三、细菌特殊染色 6

实验二 细菌分离培养和保存技术 7

一、培养基制备 7

二、细菌接种与分离 9

三、细菌培养 11

四、细菌生长现象观察 12

五、细菌菌种保存 13

实验三 细菌鉴定 14

一、生物化学鉴定 14

二、数字编码鉴定及自动化鉴定 20

三、血清学鉴定（玻片凝集试验） 22

四、分子生物学鉴定（DNA体外扩增及测序试验） 22

五、质谱鉴定 24

实验四 感染性疾病动物模型与细菌毒素检测 25

一、感染性疾病动物模型建立 25

二、实验动物采血技术 26

三、细菌内毒素的检测 27

四、细菌外毒素的毒性检测 27

实验五 细菌遗传与变异（大肠埃希菌转化实验） 28

实验六 细菌分布与消毒灭菌 29

一、细菌的分布 29

二、物理消毒灭菌法（紫外线杀菌试验） 31

三、消毒灭菌效果的评价（高压蒸汽灭菌试验） 32

第三单元 常见病原菌检验 33

实验七 球菌 33

一、葡萄球菌属 33

二、链球菌属 35

三、肠球菌属 38

四、奈瑟菌属和卡他莫拉菌属 40

实验八 肠杆菌科 41

一、埃希菌属 41

二、志贺菌属和沙门菌属 43

三、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属和沙雷菌属 46

四、变形杆菌属、摩根菌属和普罗威登斯菌属 48

五、耶尔森菌属及哈夫尼亚菌属 49

实验九 非发酵菌 50

一、假单胞菌属和产碱杆菌属 50

二、不动杆菌属和窄食单胞菌属 52

实验十 弧菌属、气单胞菌属、弯曲菌属和螺杆菌属 53

一、弧菌属 53

二、气单胞菌属 55

三、弯曲菌属 56

四、螺杆菌属 58

实验十一 苛养菌 59

一、嗜血杆菌属 59

二、军团菌属 60

实验十二 需氧革兰阳性杆菌 62

一、棒状杆菌属 62

二、需氧芽胞杆菌属 64

三、李斯特菌属 67

四、加德纳菌属 68

五、需氧放线菌属和诺卡菌属 69

实验十三 分枝杆菌属 70

一、结核分枝杆菌 70

二、非结核分枝杆菌 73

实验十四 厌氧菌 74

一、厌氧芽胞梭菌 74

二、无芽胞厌氧菌 77

实验十五 螺旋体和支原体 79

一、钩端螺旋体 79

二、梅毒螺旋体 81

三、支原体 83

实验十六 衣原体和立克次体 85

一、衣原体 85

二、立克次体 87

第四单元 真菌检验基本技术和常见病原性真菌的培养与鉴定 89

实验十七 真菌检验基本技术 89

一、真菌形态结构观察和染色技术 89

二、真菌分离培养和鉴定 90

实验十八 单细胞真菌的培养和鉴定 91

一、念珠菌属 91

二、隐球菌属 92

三、毛孢子菌属 93

实验十九 丝状真菌培养和鉴定 93

一、常见浅部真菌的培养和鉴定 93

二、曲霉菌属、毛霉菌属的培养和鉴定 94

实验二十 双相型真菌的培养与鉴定 95

第五单元 抗菌药物敏感性试验与耐药性检测 97

实验二十一 纸片扩散法药物敏感性试验和联合药敏试验 97

一、细菌及念珠菌纸片扩散法药物敏感性试验 97

二、联合药敏试验 99

实验二十二 稀释法药物敏感性试验和E-试验 100

一、细菌琼脂稀释法药物敏感性试验 100

二、细菌及念珠菌肉汤稀释法药物敏感性试验 102

三、E-试验 105

实验二十三 特殊耐药菌及耐药酶的表型检测 106

一、β-内酰胺酶的检测 106

二、超广谱β-内酰胺酶（ESBL）的检测 106

三、碳青霉烯酶的检测 108

四、耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）的检测 109

五、葡萄球菌诱导性克林霉素耐药的检测（D-Test） 110

六、耐万古霉素肠球菌的检测 111

七、耐青霉素肺炎链球菌的检测 111

第六单元 常见病毒检验技术 113

实验二十四 病毒培养技术 113

一、鸡胚接种 113

二、动物接种 115

三、组织细胞培养 116

实验二十五 病毒快速检测技术 119

一、电镜负染观察病毒 119

二、病毒抗原检测 120

三、PCR法检测HBV-DNA 121

第七单元 常见临床标本的细菌学检验 123

实验二十六 血液及骨髓标本的细菌学检验（综合性实验） 123

实验二十七 尿液标本的细菌学检验（综合性实验） 125

实验二十八 生殖道标本的细菌学检验（综合性实验） 128

实验二十九 肠道标本的细菌学检验（综合性实验） 130

实验三十 呼吸道标本的细菌学检验（综合性实验） 132

实验三十一 脑脊液标本的细菌学检验（综合性实验） 135

实验三十二 脓液、创伤感染分泌物、胸腹水及穿刺液标本的细菌学检验（综合性实验） 137

附录 140

一、常用培养基 140

二、常用染液和试剂 156

三、临床标本检验实验记录表 160

四、临床微生物实验室常用仪器设备 161

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