人体保存 细胞、组织和器官的保存技术PDF格式文档图书下载

第一篇 概况 1

第一章　细胞、组织和器官保存的一般原理 1

第一节　研究方法 1

一、整体人或动物的研究 1

目录 1

二、分离器官的灌注法的研究 2

三、组织和细胞培养技术 2

四、细胞、组织和器官的保存技术 2

（一）保存液 2

（二）保存温度 4

（三）金属容器和搪瓷容器 6

（二）-80℃保存容器 6

（一）4℃保存容器 6

二、保存容器 6

五、器官和组织切片技术 6

（二）塑料容器 6

（一）玻璃容器 6

一、盛物容器 6

第二节　保存容器 6

（三）-196℃保存容器 7

第二章　细胞形态的生化 7

（一）核酸 8

（二）蛋白质 8

一、细胞核的化学成分 8

第一节　细胞核 8

二、染色质和染色体 10

（一）脱氧核糖核酸（DNA） 10

（二）核糖核酸（RNA） 10

（三）蛋白质 10

三、核仁 10

四、核液 10

第二节　线粒体 11

一、线粒体的结构 11

二、线粒体的化学组织 11

二、内质网 12

一、微粒体 12

第三节　微粒体、内质网、高尔基复合体和核蛋白体 12

三、线粒体的功能 12

三、高尔基复合体 13

四、核蛋白体 13

（一）核蛋白体的化学组成 13

（二）核蛋白的结构及亚基 13

第四节　溶酶体 14

一、溶酶体中的酶类 14

二、溶酶体的功能 14

三、影响溶酶体膜的因素 15

第五节　过氧化物酶体 15

第六节　上清部分（胞液） 15

一、微管 15

一、质膜的化学组成与结构 16

二、微丝 16

第七节　质膜 16

二、质膜的功能 17

第八节　细胞器的相互关系 18

第二篇　细胞的保存 20

第三章　概况 20

一、冷冻损伤的机制 20

二、防止细胞在冷冻时损伤的方法 21

（一）采用适宜的冷冻和加温操作规程 21

（二）使用低温保护剂 21

三、今后的研究方向 22

第一节　精子的保存 23

一、引言 23

四、细胞的保存 23

第四章　单细胞的保存 23

二、精子的保存方法 24

三、保存后的精子妊娠效果 24

第二节　卵细胞保存 24

第三节　肿瘤细胞保存 25

第四节　单细胞及二倍体细胞培养和保存 26

一、原代细胞的培养 26

（一）培养容器 26

（二）试剂配制 26

二、细胞传代培养 27

（三）原代细胞培养 27

三、成片细胞的维持 28

四、细胞的保存 28

（一）细胞保存的意义 28

（二）细胞的保存方法 28

第五章　血细胞的保存 29

第一节　红细胞的保存 29

一、红细胞数量、结构和功能 29

（一）红细胞膜 30

（二）血红蛋白 31

二、红细胞的化学组成 34

（一）红细胞的代谢能力 39

三、红细胞代谢 39

（二）成熟红细胞的代谢特征 40

（三）影响红细胞代谢的因素 50

（四）葡萄糖代谢的酶 53

（五）其它酶系 55

（六）葡萄糖以外的能源底物之应用 58

四、红细胞中阳离子（K+和Na+）的转运及红细胞膜的透过性 59

五、红细胞的溶血（溶解作用） 60

六、载体转运 61

七、红细胞在呼吸气体运输中的功能 62

（一）呼吸气体的运输 62

（二）影响红细胞带氧能力的因素 65

（一）液体保存法（4℃保存） 72

八、红细胞的保存 72

（二）低温和超低温保存法 73

第二节　白细胞的保存 76

一、白细胞代谢的特点 76

（一）白细胞代谢的一般概况 76

（二）白细胞的能量代谢 76

（三）脂类代谢 80

（四）核酸代谢 81

（五）蛋白质代谢 82

（六）其他 84

二、粒细胞吞噬作用的生化 84

（二）粒细胞的杀菌作用机理 85

（一）粒细胞溶酶体的成分及其作用 85

三、细胞的免疫生化 86

（一）移动抑制因子 86

（二）淋巴毒素 86

（三）趋化因子 87

（四）有丝分裂因子 87

（五）通透性因子 87

（六）转移因子 87

（七）干扰素 87

四、白细胞的保存 89

（一）血小板的结构 90

一、血小板的结构和功能 90

第三节　血小板的保存 90

（二）淋巴细胞的冰冻保存法 90

（一）颗粒细胞的冰冻保存法 90

（二）血小板的功能 92

二、血小板代谢 95

（一）血小板代谢的概况 95

（二）血小板代谢 96

（三）血小板代谢和功能之间的关系 97

三、血小板的保存 97

（一）血小板的制备 97

（二）血小板的保存 97

一、引言 98

第四节　骨髓的保存 98

二、骨髓移植的途径 99

（一）自家骨髓移植 99

（二）同基因型骨髓移植 99

（三）同种异体骨髓移植 99

（四）异种骨髓移植 99

三、人体骨髓的采集 99

四、人体骨髓的移植法 100

五、人体骨髓的保存 100

（一）4℃保存 100

（二）低温冰冻保存 100

六、骨髓的临床应用 102

七、骨髓移植的副作用和并发症 102

八、骨髓的质量检定——活性鉴定 103

第五节　干细胞的保存 105

第六节　鞣化致敏红细胞的保存 105

第六章　胚胎的保存 106

一、引言 106

二、保存的方法 106

第三篇　组织的保存 107

第七章　皮肤的保存 107

第一节　表皮的代谢 107

一、表皮的糖代谢 107

（一）糖的分解代谢 107

二、表皮的脂类代谢 108

（二）糖的合成代谢 108

（一）体表脂膜 109

（二）表皮的正常脂类代谢 109

第二节　皮肤的保存 110

一、引言 110

二、保存方法 110

（一）零上4℃保存 110

（二）低温冰冻保存 111

三、皮肤内琥珀酸脱氢酶活性的定量测定法 114

第八章　骨的保存 115

第一节　骨的代谢 115

一、骨的组成 116

二、骨的生成 118

三、骨的吸收 119

四、骨的重建 119

第二节　骨胳的保存 119

一、概况 120

二、骨胳的真空干燥保存 120

三、冻干骨的临床应用 121

第九章　血管的保存 121

一、引言 121

二、生物血管（牛血管）的保存 121

二、代谢和营养 122

一、角膜的有机化学组成 122

第一节　角膜的生化 122

第十章　角膜的保存 122

（一）葡萄糖的供给 123

（二）氧的供给和消耗 123

（三）乳酸和二氧化碳的清除 123

三、渗透性 124

四、透明度 124

五、伤口愈合作用 124

六、角膜的血管新生 124

第二节　角膜的保存 125

一、引言 125

二、国外角膜保存概况 125

（一）年龄 126

（二）死亡原因 126

三、国内角膜保存概况 126

四、移植材料的采取和选择 126

（三）眼的病理 127

（四）死亡时间 127

（五）眼球处理 127

五、角膜的保存 127

（一）板层移植材料的保存 127

（二）穿透移植材料的保存 128

六、角膜内皮活性评定的方法 131

（一）生物显微镜检查 131

（二）电镜检查法 131

（三）锥蓝和丽丝胺绿染色 131

（六）角膜内皮显微镜 132

（四）组织化学酶染色 132

（五）温度逆转试验 132

第四篇 器官的保存 133

第十一章　器官移植和保存的概况 133

第一节　器官移植的概况 133

一、同种异体器官移植的基本概念 133

（一）组织相容性抗原 133

（二）人体白细胞抗原系统（HLA）的遗传性 136

（三）组织配型相容性测定 137

（四）同种供体器官的灌注与保存 138

（五）免疫抑制药物应用 138

（一）国外器官移植概况 141

二、同种异体器官移植的意义 141

（二）国内器官移植概况 145

第二节　器官保存的概况 146

一、概况 146

二、国外器官保存概况 146

三、国内器官保存概况 147

第十二章　肾脏的保存 147

第一节　肾脏的生化 147

一、尿液的生成与肾功能测定的原理及意义 148

（一）尿液的生成 148

（二）肾脏对某些物质的清除作用 150

（一）肾脏的排泄机理及水、电解质平衡 152

二、肾脏在维持内环境恒定上的作用 152

（二）肾脏在调节酸碱平衡中的作用 153

（三）非电解质的重吸收与排出 156

第二节　肾脏的保存 157

一、引言 157

（一）国外肾脏保存概况 157

（二）国内肾脏保存概况 163

二、肾脏的保存 163

（一）肾脏保存的意义 163

（二）肾脏保存的方法 164

（三）灌注保存时影响肾功能的因素 189

（四）延长低温保存期对肾组织的影响 189

（五）肾脏在长期保存中所存在的问题 190

（六）输血对肾移植存活率的影响 191

（七）肾脏保存的质量检查 192

（八）结尾 195

第十三章　肝脏的保存 195

第一节　肝脏的生化 195

一、肝脏的结构与化学组成的特点 195

（一）肝脏结构的特点 195

（二）肝脏化学组成的特点 196

二、肝脏在物质代谢中的作用 197

（一）肝脏在糖代谢过程中的作用 197

（二）肝脏在脂类代谢中的作用 217

（三）肝脏在蛋白质代谢过程中的作用 232

（五）肝脏在激素代谢中的作用 234

（四）肝脏在维生素代谢中的作用 234

第二节　肝脏的保存 235

一、引言 235

（一）国外肝脏保存的概况 235

（二）国内肝脏保存的概况 236

二、肝脏的保存 236

（一）概况 236

（二）肝脏在零上（2～6℃）温度保存 237

（三）肝脏在低温下的冰冻保存 243

（四）用高渗细胞内溶液保存肝脏的作用机制的研究 243

（五）肝脏在保存过程中所存在的问题 245

（六）肝脏保存体外质量检查指标 246

（一）糖酵解途径 247

一、无氧糖酵解与有氧糖酵解 247

第十四章　心脏的保存 247

第一节　心脏的生化 247

（二）糖醇解的控制 248

（三）糖原的生成和分解 251

（四）有氧糖酵解 255

二、氧化代谢 256

（一）脂肪酸代谢 257

（二）三羧酸循环中乙酰-CoA的氧化 259

（三）还原型NADH从胞浆到线粒体的转运 261

（四）氧化磷酸化 263

（五）能量平衡 264

（六）氧化磷酸化的机制 265

（七）氧化磷酸化控制 266

（八）糖醉解和呼吸的整合 267

（九）控制心脏产能的总体现 268

三、能量的贮存和利用 268

第二节　心脏的保存 269

一、引言 269

二、心脏的保存 270

（一）心脏在零上温度（4～10℃）的保存 270

（二）心脏在低温下冰冻保存 271

第十五章　肺的保存 273

第一节　肺的生化 273

三、脂质代谢和肺泡表面活性物质 274

一、糖代谢 274

二、蛋白质代谢 274

第二节　肺的保存 275

一、引言 275

二、肺的保存 275

（一）单次低温液灌流保存 275

（二）连续低温脉冲灌洗保存 276

（三）低温非脉冲灌洗保存 277

（四）低温高压氧 277

三、缺血对肺功能的影响 277

（一）肺对非低温缺血的耐受程度 278

（二）对非低温或低温缺血的功能肺的反应 278

一、引言 280

第十六章　胰腺和胰岛的保存 280

第一节　胰腺的保存 280

二、胰腺的保存 281

（一）胰腺在零上温度（4～10℃）的保存 281

（二）胰腺在低温下的冰冻保存 283

第二节　胰岛细胞的保存 285

一、供体胰岛组织的制备 285

（一）大鼠胰岛的分离 285

（二）成年人胰岛分离 285

（三）胚胎胰腺 285

（一）胰岛细胞在零上温度（4～10℃）的保存 286

（二）胰岛细胞在低温下的冰冻保存 286

二、胰岛细胞的保存 286

第三节　胰岛细胞和胰腺组织的培养技术 288

一、胰岛细胞的培养 288

（一）实验动物胰岛细胞的培养 288

（二）胚胎胰岛的组织培养 290

（三）人胰岛细胞的培养 290

二、人体胰腺节段组织的培养 290

第四节　胰岛移植 291

一、实验性胰岛移植 291

（一）胚胎移植研究 291

（一）胰岛异体移植 292

二、胰岛移植的临床研究 292

（三）大动物胰岛移植研究 292

（二）啮齿类胰岛移植研究 292

（二）胰岛自体移植 293

第十七章　小肠的保存 293

一、小肠在零上（4～6℃）温度保存 293

二、小肠在零下温度的保存 294

第五篇　血液代用品 295

第十八章　血液代用品在细胞、组织和器官保存中的应用 295

第一节　血液代用品应用概况 295

五、小肠保存 296

四、肾脏保存 296

（二）保存 296

（一）分离 296

三、白细胞和血小板的分离和保存 296

（一）在4℃的分离和保存 296

二、红细胞分离和保存 296

一、全血保存 296

（二）在-196℃液氮中保存 296

六、心脏保存 297

第二节　国内外血液代用品的概况（类型、性能） 297

一、晶体盐类溶液 297

（二）血清注射液 298

（三）血浆注射液 298

（四）血清白蛋白溶液 298

（一）全血注射液 298

二、含人血成分的血液代用品 298

（五）血红蛋白 299

（六）多种血浆蛋白溶液 300

三、含异种蛋白的血液代用品 300

（一）以动物血液成分制成的蛋白溶液 300

（二）明胶溶液 300

四、含植物胶体的血液代用品 301

（一）植物糖类 301

（二）植物蛋白 302

五、含合成胶体的血液代用品 302

（一）右旋糖酐 302

（二）聚乙烯吡咯烷酮（PVP）溶液 303

（一）蛋白质水解产物 304

六、蛋白质水解产物和脂肪乳剂 304

（三）聚乙烯乙醇溶液 304

（二）脂肪乳剂 305

七、人工血或称带氧血液代用液 306

（一）人工血红蛋白 306

（二）人工细胞 306

（三）全氟碳化合物乳剂 307

第三节　血液代用品的临床应用 308

一、防治失血性休克 308

二、治疗感染性休克 308

三、治疗某些心血管疾病 309

四、用作心肺机的预充剂 309

七、血液代用品的副作用 310

第四节　结语 310

六、其他用途 310

五、烧伤补液 310

附录 312

一、基础试剂 312

二、细胞培养液 319

三、本书引用的略号 321

四、糖酵解酶英汉名称对照表 322

五、核苷酸及其衍生物的一些物理常数 322

六、氨基酸的一些物理常数………………3？七、常用缓冲液的配制 331

八、离心机转数（RPM）与离心力（G）的换算 336

九、本书常用度量衡 337

参考文献 338

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