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第1章 分子生物学常规实验技术 1

第1节 凝胶电泳 1

第2节 质粒DNA的制备 8

第3节 真核细胞DNA的制备与定量 15

第4节 总RNA的提取和分析 19

第5节 cDNA文库的构建 27

第6节 聚合酶链式反应（PCR） 37

第7节 重组DNA的构建、筛选与鉴定 47

第8节 Southern杂交 55

第9节 Northern杂交 63

第10节 Western免疫印迹 68

第2章 蛋白质提取与纯化技术 72

第1节 蛋白质制备的基本步骤 72

第2节 层析法分离纯化蛋白质 86

第3章 哺乳动物细胞和组织基因表达分析 111

第1节 逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR） 112

第2节 实时定量RT-PCR 124

第3节 酶联免疫吸附试验方法（ELISA） 134

第4章 报告基因技术 143

第5章 基因调控序列分析 155

第6章 聚合酶链式反应引导的基因定点突变 165

第7章 重组基因大肠杆菌表达产物的制备 171

第1节 大肠杆菌表达的策略 171

第2节 细菌裂解方法和包涵体复性技术 182

第3节 融合蛋白的酶解和化学裂解方法 188

第4节 实用举例 191

第8章 酵母菌遗传学方法 198

第1节 酵母菌的培养 198

第2节 酵母菌DNA分离 199

第3节 酵母菌RNA的制备 202

第4节 酵母菌蛋白质的提取 203

第5节 外源DNA导入酵母细胞的方法 204

第9章 酵母双杂交技术 208

第10章 噬菌体展示技术 227

第1节 噬菌体展示技术简介 227

第2节 噬菌体随机肽库的构建与筛选 231

第3节 噬菌体抗体库技术 234

第11章 转基因小鼠模型的建立 237

第12章 哺乳动物细胞中的RNA干扰技术 253

第13章 细胞信号转导通路检测技术 264

第1节 概述 264

第2节 信号转导通路的基本研究思路和方法 268

第3节 蛋白激酶的检测 288

附录 通用试剂与缓冲液的配制 293

主要参考文献 296

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